1.2 微生物的基本培养技术（第四课时）-【探究课堂】2022-2023学年高二生物同步优质课件（人教版2019选择性必修3）

第1章发酵工程 第2节微生物的培养技术及应用 (第四课时) ● 用 学习目标 通过实例，理解各类微生物都能适应其生 01 活环境。（生命观念) 通过对土壤中分解尿素的细菌进行分离和计 数，理解并掌握微生物计数的方法。（科学 目标 02 探究) 根据微生物的代谢类型，配制选择培养 基，总结分离微生物的过程和测定微生 03 物数量的常用方法。（科学思维）》 温故知新：稀释示布平板法和平板划线法的比较． 主要方法稀释涂布平板法平板划线法 主要步骤系列梯度稀释操作和涂布平板操作接种环在固体培养基表面连续划线 共同点使培养基上形成由单个细菌细胞繁殖而来的子细胞群 体——菌落 问题1：怎么通过稀释涂布平板法统计活菌的数目呢?还有哪些统计活菌的方法呢? 微生物的数量测定 稀释 稀释 103倍 104倍 (一)统计菌体数目： 1稀释涂布平板计数法 间接计数法 空白 稀释 对照 105 倍 2 显微镜直接计数法 直接计数法 血细胞/细菌计数板 微生物的数量测定 (一)统计菌体数目： 稀释涂布平板计数法 间接计数法 (1)原理： 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落 来源于样品稀释液中的一个活菌。通过计数平板上的菌落数， 就能推测出样品中大约含有多少活菌 样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目 微生物的数量测定 >恰当的稀释度、涂布是否均匀是成功统 (一)统计菌体数目： 计菌落数目的关键。 1稀释涂布平板计数法 间接计数法 (2)计数原则： 同一稀释度下，应至少 选择菌落数为30300 对3个平板进行重复计 的平板计数。 数，然后求出平均值 01 统计的结果一般用菌 统计的菌落往往比 落数而不是活菌数。 活菌的实际数目低 04 03 微生物的数量测定 (一)统计菌体数目： 1稀释涂布平板计数法 (3)计算公式： 每g样品中的菌落数= (C÷V)xM ◆C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数 ◆V代表涂布平板时所用的稀释液的体积mL) ◆M代表稀释倍数 实战训练 1.甲同学做此实验在稀释倍数105获得3个平板，菌落数分别是80、 90、100,涂布平板时均使用0.1ml菌液，试计算每克土壤中可以 分离尿素的细菌数目？ (80+90+100)/3 0.1 ×105=9×107个 2.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均 数为234，那么每g样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的 体积为0.1mL)（ A.2.34×108 2.34×109 C.234 D.23.4 实战训练 3.用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为 106的培养基中得到以下几种统计结果，其中正确的是（) A.涂布了1个平板，统计的菌落数是230 B.涂布了2个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238 C.涂布了3个平板，统计的菌落数分别是13、234和254，取平均值167 涂布了3个平板，统计的菌落数分别为210、240和250，取平均值233 微生物的数量测定 (一)统计菌体数目： 显微镜直接计数法 直接计数法 (1)原理： 利用细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中 微生物的数量。 血细胞计数板 细菌计数板 常用于相对较大的酵母菌 对细菌等较小的细胞进 细胞、霉菌孢子等的计数。 行观察和计数。