1.2.2 微生物的选择培养和计数-【精讲课堂】2022-2023学年高二生物同步备课精制课件(人教版2019选择性必修3）

人教版释性修 3 第1章发酵工程 第2节微生物的培养 技术及应用 (二)微生物的选择培养和计数 选择培养基 >科学实例：寻找耐高温的DNA聚合酶 ◆1973年，布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中 发现了耐热的水生栖热菌，并从这种菌种提取出耐 高温的DNA聚合酶。 美国黄石公园 聚合酶链式反应(PCR)是一种在体外扩增DNA片段的 技术，此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。 筛选原因：水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存，而绝大多数微生物在 此条件下不能生存。 选择培养基 启示：根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 耐热微生物 实验室微生物筛选原理：， 耐寒微生物 为提供有利于目的菌生长 的条件（包括营养、温度 和pH)等，同时抑制或 阻止其他微生物生长。 石油分解菌 纤维素分解菌 选择培养基 ⅲ择培基 1.概念：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或 阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。 2.类型：____ 选择培养基 【思考讨论】 --选择培养基的设计 尿素[CONH2)2]含氨量高，化学性质稳定，是现代农 业生产中一种重要的氨肥。 尿素的立体结构 尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH3, 再被转化为NO3、NH4+等被植物吸收。 而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶。 脲酶催化尿素分解产生NH3,NH3可以为细菌生长的氨源。 C0NH2)2+H20 脲酶 →2NH3+CO2 常见的分解尿素的微 怎样才能将分解尿素的细菌从土壤中分离出来？ 生物：芽孢杆菌、小 球菌、棒状杆菌等细 使用以尿素为唯一氮源的选择培养基进行分离 菌，某些真菌和放线 菌也能分解尿素。 选择培养基 牛肉膏 5.0g 除以尿素作为唯一氮源外，该培养基 培 蛋白陈 10.0g 的其他营养成分与普通培养基基本相同。 基 NaCl 5.0g 琼脂 20.0g 蒸馏水 定容到1000ml KH2P04 1.4g NaH2P04 2.1g 培 MgS04 0.2g 基 7H20 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 定容到1000ml >如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素的细菌的过程示意图。下 列有关叙述错误的是 上清液 2 mL A.在配制步骤②③的培养基时，应先 ①制备红棕 ②在选择培③筛选、纯 ④细菌分解尿 壤浸出液 养基中培养化分解尿素 素能力的鉴定 调pH后湿热灭菌 的细菌 和比较 B.骤③纯化分解尿的细菌的原理是将聚集的细菌分散，获得弹菌落 步骤③采用稀释涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入 尿素 D.步骤④挑取③中不同种帕的菌落分别接种，比较不同种细菌分解尿素的 能力 微生物的选择培养 1g土壤中有多少能分解尿素的细菌？ 稀释涂布平板法 分离：获得分解尿素的细菌的纯培养物 I 计数：测定分解尿素的细菌的数量 概念：将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别 涂布到固体培养基的表面，进行培养。 主要过程：A、 梯度稀释菌液B、涂布平板 稀释度足够高时，能在培养基表面形成单个菌落。 台典 微生物的数量测定 11:48 WIFI 88% 68 (有BGM) 土壤中分解尿素的细菌的分离与 3 R,3人正在看 生物实验教师易任远 01:04 07:35 菌 将10g土壤加入90mL无菌水中 选集 1.25X 自动 微生物的选择培养 稀释涂布平板法 (1) 梯度稀释 注意：取土样用的小铁铲和纸袋在使用前都要灭菌。 8由有年由8年年电。车年生电年生电。。年年由8生8年南有。车由8年年电。年生电88年生生8年车室年生8生年由。g车由有8年年电生年年车电8 ①铲取土样，将样品装入纸袋中 1 mL 1 mL 1 mL 1mL 1 mL 1 mL 10g 1×1021×1031×1041×1051×106 1×107 1×10 ②将10g土样加入 盛有90mL无菌水 90mL无菌水 9mL无菌水 的锥形瓶中，充分 摇匀，制成菌液。 取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释