内容正文:
第1节 重组DNA技术的基本工具
基础巩固
1.以下关于质粒的叙述不正确的是( C )
A.质粒上有复制原点,可以在宿主细胞中自主复制
B.细菌的质粒是独立于拟核之外的小型双链环状DNA
C.具有一个或多个限制酶切点,便于目的基因的表达
D.天然质粒需经过改造后才能应用于基因工程的操作
解析:载体中必须具有一个或多个限制酶切点,以便于目的基因插入。
2.下列关于基因工程相关工具的说法,正确的是( D )
A.限制酶能切割双链DNA片段,也能切割烟草花叶病毒的核酸
B.迄今分离出的限制酶有数千种,均是在原核生物中分离纯化出来的
C.据酶的功能不同,可以将DNA连接酶分为两类:E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶
D.细菌质粒是独立于细菌拟核DNA之外的双链DNA分子,用作基因工程载体的质粒都是经过人工改造的
解析:限制酶只能切割DNA分子,烟草花叶病毒的核酸是RNA,不能被限制酶切割;现已分离出的限制酶有数千种,限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的;据酶的来源不同,可以将DNA连接酶分为两类:E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶。
3.限制酶是一种核酸内切酶。可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ和BglⅡ的识别序列和切割位点切割出来的DNA黏性末端,可以互补配对的是( C )
A.BamHⅠ和EcoRⅠ B.BamHⅠ和HindⅢ
C.BamHⅠ和BglⅡ D.EcoRⅠ和HindⅢ
解析:BamHⅠ和BglⅡ切出的黏性末端相同,都是GATC,可以互补。
4.限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是和。下图表示四种质粒和目的基因,其中,质粒上箭头所指部位为酶的识别位点,阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因载体的质粒是( A )
解析:A项中用限制酶MunⅠ切割该质粒后,不会破坏标记基因,而且还能产生与目的基因两侧黏性末端相同的末端,适于作为目的基因的载体;B项中该质粒没有标记基因,不适于作为目的基因的载体;C、D项中质粒含有标记基因,但用限制酶切割后会被破坏,因此不适于作为目的基因的载体。
5.已知某种限制酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点,如下图中箭头所指,如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断,则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子,若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断,则从理论上讲,经该酶酶切后,这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是( C )
A.3 B.4 C.9 D.12
解析:从这三个切点进行酶切,可得到片段种类有四种(即a、b、c、d四种);从其中两个切点进行酶切,可得到不同于前面的片段种类有三种(即a+b、b+c、c+d三种);只有一个切点,得到不同于前面的片段种类有两种(即a+b+c、b+c+d两种)。故最多能产生DNA片段种类是4+3+2=9种。
6.下列关于DNA粗提取与鉴定实验的有关叙述中,不正确的是( B )
A.将鸡的成熟红细胞置于清水中,红细胞破裂后将DNA释放出来
B.用2 mol/L的NaCl溶液溶解提取物并离心后,需弃去上清液
C.在提取液中加入95%冷酒精后DNA会与蛋白质分离并析出
D.该实验操作中用玻璃棒搅拌时,要沿一个方向进行
解析:DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,NaCl溶液浓度为
2 mol/L时,DNA溶解度最大,所以用2 mol/L的氯化钠溶液溶解提取物并离心后,需保留上清液。
7.不同储藏条件对棉叶DNA纯度及提取率(提取率越高,获得的DNA越多)的影响,结果如图所示。下列有关叙述正确的是( C )
A.利用NaCl溶液提取DNA时,NaCl溶液浓度越大,DNA的溶解度越小
B.新鲜棉叶的DNA纯度最高,提取DNA的量也最多
C.冷冻保存3 d组的DNA提取效果优于冷鲜保存3 d组
D.用二苯胺试剂鉴定,蓝色最浅的是冷冻3 d处理后提取的DNA
解析:DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低;新鲜棉叶提取的DNA纯度最高,但提取率不是最高的,因此新鲜棉叶提取DNA的量不是最多的;冷冻3 d处理提取的DNA量是最多的,因此用二苯胺试剂鉴定,颜色最深的是冷冻3 d处理后提取的DNA。
8.下图表示一项重要的生物技术,对图中物质a、b、c、d的描述,正确的是( A )
A.通常情况下,a与d需要用同一种限制酶进行切割
B.b能识别特定的核苷酸序列,并将A与T之间的氢键切开
C.c连接双链间的A和T,使黏性末端处碱基互补配对
D.b代表的是限制性内切核酸酶,c代表的是RNA聚合酶
解析:b代表的是限制酶,能识别特定的核苷酸序列并使DNA分子的每一条链中特定部位的两个核苷酸之间