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第三章
动物细胞工程
第一节
细胞培养是动物细胞工程的基础
课程解读
知能目标
核心素养
1.认同动物细胞培养是动物细胞工程的基础
1.概述动物细胞培养的过程
2.认识动物细胞培养是动物细胞工程常用的技术
2.举例说明动物细胞培养的应用价值
手段,加深对科学、技术、社会相互关系的认识,
学会运用生物学原理解释生物学社会议趣
新教材·知本与思辨
学科素养研读、知本、思辨
(见学生用书P46)
②知识点一动物体细胞可在体外适宜条件下进行培养
1.动物细胞培养:从动物体获得相关组织,分散成单个细胞后,在适宜环境下让
细胞生长和增殖的过程。
2.动物细胞培养的适宜条件
()温度:大多数情况下,细胞生长的最适宜温度是37℃,温差一般不超过±0.5℃。
(2)pH:大多数细胞适宜的pH为7.2~7.4,偏离此范围对细胞产生有害影响。造成
培养基H波动的主要物质是细胞代谢产生的CO2,可通过给培养箱提供恒定的
S%的CO2浓度,使之与培养基中的NaHCO3处于平衡状态,调节pH的相对稳定。
(③)95%的空气可以保证细胞呼吸对氧气的需要。
(4)无菌、无毒的条件
①培养材料、培养基、培养环境、操作过程严格控制无菌。
②在培养基中加入抗生素能抑制细菌和真菌的生长,从而预防污染。常用的抗生素
有青霉素、链霉素、卡那霉素和庆大霉素等。
③动物细胞培养液中常含有在高温条件下变性失去功能的物质,如血清等,因而对
培养液的这些成分采用过滤除菌。
④为防止细胞代谢产生的有毒物质危害细胞,应定期更换培养液。
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3.动物细胞的生长和增殖需要充足的营养物质。培养动物细胞的培养基通常为液体
培养基。
()基本成分:水、无机盐、氨基酸、维生素、糖类、生长因子等。
(2)按培养基来源分类
名称
成分
不足
联系
主要来自动物体液或动物组织
分离提取液,如血清、淋巴
液、鸡胚浸出液等。成分与
天然培
成分复杂,
细胞在体内需要的成分比较接
养基
来源受限
近,含有丰富的营养物质及各
种生长因子等,渗透压、
pH也与体内环境相似
实际工作中往往将天然培
根据细胞生存所需物质的种
人们并没有完全
养基与人工合成培养基结
合成培
类和含量,用人工方法模拟
了解动物细胞所
合使用,如在合成培养基中
养基
合成的,便于对各种成分进行
需要的全部物质
添加一定比例的血清
人工控制和标准化
或其他天然成分
小思考:幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较,分化程度低的细胞与分化程度高的细
胞比较,哪些细胞更易于培养?为什么?
【答案】细胞的增殖能力与供体的年龄有关,幼龄动物的细胞增殖能力强,有丝分裂
压盛,老龄动物的细胞则相反。所以,一般来说,幼龄动物的细胞比老龄动物的细胞易于培
养;分化程度越低的细胞,增殖能力越强,所以分化程度低的细胞更容易培养。
回知识点二动物细胞培养包括原代培养和传代培养
1.培养过程和细胞生长特点
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概念
将目茶微生指转移到培养基中的过程
所用工具涂布器或接种环
接种环应在明火上灼烧,待其冷却
后再接种
种
培养
使用涂布器接种时,应将涂布器浸泡
在75%的酒精中,再在酒精灯火
过程
焰上灼烧,待其冷拉后用于涂布
注意事项
在接种过程中,打开塞子后和塞上塞
子前都要将瓶口或试管口在酒游灯火焰
上灼烧灭菌
接种时要靠近酒精灯的火焰:尽量减
少各种器皿散口向上的时间和机会
①贴壁生长:贴壁是有机体细胞在体内生存和生长发育的基本方式,包
括细胞与细胞间的相互接触和细胞与细胞外基质之间的相互接触。体外
培养时,绝大多数细胞仍然保持贴壁生长的特性,必须贴附在某一固相
细胞生
支持物上生长
长特点
②接触抑制:当细胞由于移动而相互靠近发生接触时,细胞不再移
动,接触区域的细胞膜皱褶样活动停止,最终细胞分裂停止,这种
现象称为接触抑制
2.原代培养和传代培养
()原代培养:细胞或组织离开有机体后的首次培养。
(2)传代培养
①需要传代培养的原因:随着时间的延长,体外培养的细胞数量不断增加。当增长到一
定程度后,由于发生接触抑制或培养空间的限制及营养物质的消耗枯竭,生长会
逐渐减慢,甚至停止并死亡。
②操作:将原培养瓶内的细胞分离并稀释后转到多个培养瓶中,在新的培养基中进
行传代培养。
③要求:一般米说,原代培养的贴壁细胞达到生长基质的80%衣面面积后可进行传
代培养。若传代过晚,可影响下一代细胞的机能状态。贴壁生长的细胞需经酶消化
制成细胞悬液后才能传代。
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