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第一章
发酵工程
第一节
微生物的培养需要适宜条件
课程解读
知能目标
核心素养
1阐明使用无菌技术可以获得纯净的微生物培养物
1.认识无菌技术是获得纯净微生物培
2.概述培养基的营养构成,无菌技术的原理、常用设
养物的重要方法
备和方法
2.尝试配制培养基培养酵母菌,学
3。通过对酵母菌培养基的配制,初步掌握一些常规的
会无菌操作方法
无菌操作
新教材·知本与思辨
一学科素养研读、知本、思辨
(见学生用书P)
回知识点一培养基为目标微生物提供适宜的生长环境
1.培养基
人们为满足微生物生长繁殖或积累代谢产物的需求而配制的混合
定义
养料
水、二碳源、氮源和_无机盐_,某些微生物需要_生长因子(特定的
成分
维生素、氨基酸、嘌玲和嘧啶等有机化合物
()成分上:“细菌喜荤,霉菌喜素”
理化
(2)pH:细菌通常要求在中性信碱的环境中生长,霉菌要求在中性偏
特性
酸的环境中生长
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分类
主要
特点
适用范围
依据
类型
液体培
没有添加
大规模快速繁
养基
凝固剂
殖某种微生物
“平板”常用于
培养
在液体
微生物的分离、
基的
培养基
鉴定、活菌计
物理
中添加
固体培
数等
特征
定量
养些
的凝围
剂
制
“斜面”常用于
成的
菌种保存
分类
一般用于在实验室
金成培
化学成分
进行的、要求可重
养兰
完全清楚
复性强的各种研究
培养
工作
基的
化学
由还不十
成分
分清楚或除了在实验室常用
天然培
成分不恒
外,更多地被用于
养基
定的天然
大规模的生物发
有机物
酵工业
制成
2.培养基案例
()细菌培养基:常用蛋白陈和酵母提取物等来配制
(2)霉菌培养基:一般用可溶性淀粉加无机物配制或用添加蔗糖的豆芽汁来配制。
小思考:()加入培养基中的凝固剂(如琼腧能被微生物利用吗?
(②)如何通过培养基的营养组成来判断微生物的同化类型?
【答案】(①)不能。凝固剂只起到凝固的作用。
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(2)自养型微生物的培养基主要以无机营养为主:异养型微生物的培养基主要以有机营养
为主。
©知识点二灭菌和无菌操作技术可以排除非目标微生物的干扰
1.目的:获得纯净的微生物培养物。
2.关键:防止杂菌污染。
3.消薄
(1)定义:消灭大部分微生物。
(2)原理:加热使蛋白质变性、紫外线使菌体的蛋白质和核酸变性。
(③)列举物理方法:煮沸消毒,紫外线照射等。
(4)列举化学方法:75%的酒精、高锰酸御、5%的次氯酸钠、漂白粉等。
4.灭菌
(1)杀死所有微生物,包括有些细菌产生的芽孢结构。
(2)高压蒸汽灭南法、过滤除菌、灼烧灭菌的比较
设备
高压灭菌锅
高压
灭菌条件
121℃,1kgcm2的压力,15~20分钟
蒸汽
除了高温下会分解的物质,大部分都适用。灭菌前,各种物品需用
灭菌
灭菌对象
牛皮纸或报纸包好,棉塞不能用脱脂棉,原因是脱脂棉易吸水,吸水后
易污染。灭菌后,灭菌物品放入60~一80℃的烘箱中烘干,除去水分
常用G6玻璃砂漏斗,其孔径小到细菌不能通过,若孔径更小可
过滤
设备
阻止病毒或蛋白质通过
除菌
除菌对象
遇高温会分解的物质如尿素、葡萄糖等
设备
酒精灯
灼烧
接种环等,接种环的环部、金属丝、金属丝与柄的连接部、连接部
灭菌
除菌对象
的上端在明火上灼烧,使黏附在其表面的微生物在高温中炭化
5.接种
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各种器皿敞口向上的时间和机会
6.防止杂菌污染的操作
(1)操作在_酒精灯_火焰旁进行。
(2)棉塞拔出后_不能_放在超净台消毒过后的台面上。
(3)培养皿的皿盖打开的正确的操作是_打开一条缝
(4)操作中超净台需一直打开_过滤风(风吹向操作者)
(5)接种前后接种环都需要_灼烧_灭菌。
小思考:进行无菌操作时,如何选择消毒和灭菌?
【答案】考虑效果:灭菌的效果比消毒要好。考虑操作对象的承受能力:活体生物材
料、操作者的手等只能采用消毒的方法,而不能采用灭菌的方法。
四知识点三活动:配制可用于培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基
1.活动目的;配制液体培养基和固体培养基。
2.20%马铃薯蔗糖培养基的配方
去皮_马铃薯丝_(或小块20g、蔗糖2g、琼脂1.5~2g、水100mL(自然pH)。
3.方法步骤
(1)_计算_:根据配方计算出各种材料的用量
i马铃薯处理后用酒精灯加热,
煮沸10min后,进行—过滤
(2)