内容正文:
第1章发酵工程
第2节微生物的培养技术及应用
(第二课时)
●
用
学习目标
掌握通过配制培养基,了解配制培养基的
基本步骤,以及培养基中各类营养物质的
01
配比。(生命观念)
通过对培养皿和培养基进行灭菌,了解
02
目标
消毒和灭菌的原理及方法。(科学思维)
通过对酵母菌进行纯培养,理解并掌握
微生物接种、分离和培养的基本原理和
03
过程。(科学探究)
温故知新:培养基的配制和无菌技术
按物理性质划分
培养基的类型
按组成成分划分
按功能划分
培养基
基本成分:碳源、氮源、水、无机盐
培养基的营养物
特殊需求:维生素
(如乳酸杆菌)、
微生物的基
质
碱基等
本培养技术
巴氏消
化学药剂消毒
常用的消毒方法
煮沸消毒
紫外线消毒
无菌技术
湿热灭菌
常用的灭菌方法
的烧灭菌
热灭菌
问题1:微生物结构简单、形体微小,
眼睛看不到,若想看某种纯净的微生
物,当我们掌握了培养基配制和无菌技术后,我们接下来该如何操作?
微生物的纯培养
(一)培养物、纯培养物、纯培养概念辨析:
1.培养物:
在微生物学中,将接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生
物的群体。
2.纯培养物:
由单一个体繁殖所获得的微生物群体。
3纯培养:获得纯培养物的过程就是纯培养。
(二)纯培养的步骤:
配置培养基
灭菌
倒平板
接种和分离
培养
微生物的纯培养
酵母菌的纯化培养过程(视频)
已关型生生
上连矩道网路料技有佩公司
微生物的纯培养
合作探究一:请同学们自主学习教材P11-13页,小组合作思考讨论完成问题。
1.倒平板时
(1)为什么需要使锥形瓶的瓶口过火焰?
(2)平板冷凝后,为什么要将平板倒置?
(3)怎么确定所倒平板未被杂菌污染?
2.平板划线法时注意事项有哪些?
3.接种过程中在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?
4.在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开
始划线?
5.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作
结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?
微生物的纯培养
(二)纯培养的步骤:
1.配制培养基:
用纱布过滤
u
加水1000mL,加热
得到滤液
煮沸至马铃薯软烂
切成小块
滤液中加入20g葡
萄糖,15-20g琼脂
称取去皮的马铃薯200g
用蒸馏水定容至1000mL
(二)纯培养的步骤:
2.灭菌:
培养皿叠成一束
放入干热灭菌箱内,
160~170∘C灭菌2h
用几层牛皮纸包紧
取5~8套培养皿
压力100kPa、温度
为121C的条件下,
包上牛皮纸,并用皮筋勒紧灭菌15~30min
将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加棉塞
微生物的纯培养
(二)纯培养的步骤:
3倒平板:
待培养基冷却至50℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。
翻转
①拔出锥形瓶的棉塞
②将瓶口迅速通过火焰
③用拇指和食指将培养皿打开
④等待培养基冷却凝固
一条稍大于瓶口的缝隙,将
后,将培养皿倒过来放置。
培养基(10-20mL)倒入培养
皿,立即盖上皿盖。
倒平板注意事项:
温度:50℃左右
操作:在酒精灯火焰附近
冷凝后平板倒置
微生物的纯培养
(二)纯培养的步骤:
3.倒平板:
超净工作台的使用:
一般的无菌操作产该在
超净工作台内完成。
问题1:为什么需要使锥形瓶的瓶口过火焰?