第2部分 热点6 基因工程中PCR的原理及应用-【导与练】2023高考生物二轮复习教学课件PPT（新教材）

导与球 热点6 基因工程中PCR的 原理及应用 8的 [知识关联] 模板 常规PCR 原料 反向PCR 与体内复制的区别 酶 DNA复制 分类 大引物PCR 引物 重叠延伸PCR PCR及其应用 变性 目的基因的获取和扩增 目的基因的检测 相关数据的计算 复性 反应过程 应用 定点诱变 延伸 [针对训练] 1.(2022山东威海二模)《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第九版）》对于解除隔离管理标准做了 新规定：轻型病例连续两次新型冠状病毒核酸检测（采样时间至少间隔24小时）N基因和ORF基因Ct值 均≥35，可解除隔离管理。利用荧光定量PCR方法测某基因的Ct值是指将某目的基因与过量的荧光 素混合后放入PCR反应体系中，随PCR产物的积累荧光信号逐渐增强，将荧光信号到达设定阈值时所 经历的循环次数称为Ct值。下列说法错误的是( B) A.利用荧光定量PCR方法测N基因和ORF基因的Ct值时，应先通过逆转录得到N基因和ORF基因对应的 DNA序列 B.采样标本中的N基因和ORF基因数量越多，Ct值越大 C.PCR反应过程中每次循环都要经历目的各不相同的两次升温和一次降温 D.基因工程中PCR技术可用于获取和扩增目的基因以及检测目的基因是否插入受体细胞的染色体 DNA上 解析：分析题意，将荧光信号到达设定阈值时所经历的循环次数称为Ct值，故样本中初始模板越 多时，达到设定的荧光阈值时所经历的扩增循环数就越小，Ct值就越低。 4444444444444 8的 2.(2022全国高三专题练习)如图是快速RT-PCR过程示意图，①和②为逆转录酶 催化的逆转录过程，③是PCR过程。据图分析下列说法错误的是(B) A.逆转录酶具有DNA聚合酶能力 5、 引物a B.③过程只需要引物b 3 ①↓ 5'靶RNA 5 3'cDNA C.RT-PCR可检测基因是否转录 3 ②↓ 5'RNA 5 D.RT-PCR可检测新型冠状病毒等RNA病毒 3'cDNA 引物b 5 3 DNA 解析：③PCR过程需要引物a、b。 ⑧★ 3.(2020江苏卷)如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列 两侧的序列，具体流程如图(以EcoRⅠ酶切为例)： ∥连接，DNA连接酵 已知序列 __扩增|TaqDNA聚合酬 Ⅳ测序，分析[ 。…………3片段 5′……… 请据图回答问题。序列 (1)步骤Ⅰ用的EcoRⅠ是一种_酶，它通过识别特定 的__________切割特定位点。 解析：（)根据题图可知，步骤I是为了获取目的DNA片段，所用的酶EcoR 是一种限制酶，其能识别特定的核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个 核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 答案：(1)限制性内切核酸（或限制） 核苷酸序列 8的 3.(2020江苏卷)如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列 两侧的序列，具体流程如图（以EcoR I酶切为例）： 染色体DNM I酶切ER1〔学TX) 混合的DNA片段 5未知序列已知序列未知序列号'片段F I连接，DNA连接酶 已知序列 PCR引物 环状DNA EcoR T Ⅲ扩增！Tag DNA聚合酶 PCR产物 N测序、分析】 5 …3片段F 的完整 请据图回答问题。 序列 (2)步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3'-羟基与5'-磷酸间形成 PCR循环中，升温到95℃是为了获得 ;Tag DNA聚合酶的作用是催化 解析：(2)步骤川是将目的DNA片段连接成环状，其中DNA连接酶的作用是催 化相邻核苷酸之间的3'-羟基和5'-磷酸间形成磷酸二酯键。PC循环中， 升高温度到超过90C是为了打开氢键使双链解旋，获得DNA单链，Tag DNA 聚合酶的作用是催化以DNA为模板延伸成子链的过程。 答案：(2)磷酸二酯键 DNA单链I 以DNA为模板的DNA链的延伸 8的 3.(2020江苏卷)如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列 两侧的序列，具体流程如图（以EcoR I酶切为例）： 染色体DNA 请据图回答问题。 I晦切EeoRICIAATTC) CTTAAG 混合的DNA片段 (3)若下表所列为己知的DNA序列和设计的一些 51 未知序列已知序列■ 未知序列 '片F PCR引物，步骤Ⅲ选用的PCR引物必须是 Ⅱ连接！DNA连接酶 已知序列 (从引物①②③④中选择，填编号)。 PCR引物 环状DNA DNA序列（虚线处省略了部分核苷酸序列） EcoR I 5-AACTATGCGCTCATGA--. IⅢ扩增！Tag DNA聚合酶 已知 3-TTGATACGCGAGTACT-- PCR产物 N测序、分析 序列 CCAATCCCTACCCTCT-3' 5 …3片段F CGTTACGC