第3章 第1节 重组DNA技术的基本工具-【考点同步解读】2022-2023学年新教材高中生物选择性必修3 生物技术与工程（人教版）

第3章 〉基因工程 第1节 重组DNA技术的基本工具 高考要求学业标准·考情分祈 一考点分布· 学科素养· ·命题趋势· 卓 I.阐明重组DNA技术所需的三 1.考查重组DNA技术所需的限制性内 科学思维 第2草 种基本工具的作用。（★★★） 切核酸酶，DNA连接酶的特点和作用，以及基 科学探究 因进入受体细胞的载体种类和作用。 社会责任 第 2.能够进行DNA的粗提取与鉴 2.考查DNA的粗提取的原理，实验用 定。（★） 生命观念 具、方法步骤及实验结果分析与评价等内容。 4 考点分类考点透析·宾例剖析 考点1 限制性内切核酸酶一 “分子手术刀” 5年4考* 块 ·核心总结 奇难点突破， 1.存在：主要存在于原核生物中。 有关限制性内切核酸酶的 2.特性：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并 三大问题 且能在特定的位点上切割DNA分子。 (1)酶的特点 3.切割的部位：磷酸二酯键。 ①限制性内切核酸酶（限 4.产物：黏性末端或平末端。 制酶)是一类酶，而不是一种酶。 (1)黏性末端：是限制酶在识别序列的中心轴线两侧将 ②不同种类的限制酶识 DNA分子的两条链分别切开时形成的（错位切），如图所示： 别与切割的位点不同，与酶的 EcoRI 专一性一致 AATTC (在G与A CTTAA ③原核生物体内的限制 之间切割) 酶不切割自身的DNA,原因 中轴线 (2)平末端：是限制酶在识别序列的中心轴线处切开时形 是其自身的DNA分子不存在 成的（平切），如图所示： 该限制酶的识别序列或识别 序列已经被修饰。 Sma I E 图 (2)识别序列：呈现碱基互 (在G与C 补对称：无论是奇数个碱基还 之间切割) 巾线 是偶数个碱基，都可以找到一 ⊙考题1(2022·河北石家庄高二练习)（多选）下图是几种 条中世轴线，为瓷瓷以中 不同限制酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列叙述正确的 是( )。 心线（虚线）为轴，两侧碱基互 104 第3章>基因工程]/ 一CTGCA 一G -TG -G -G CTTAA-AC -CTGCA 外对：又如8瓷以片 ① ② ③ ④ 为轴，两侧碱基互补对称。 A.以上DNA片段是由3种限制酶切割后产生的 (3)切割产物 GAATT ①不同DNA分子用同一 B②片段是在识别序列为CTTaA专 的限制酶作用下形 种限制酶切割形成的黏性未 成的 端或平末端都相同：同一个 C.①和④两个片段在DNA聚合酶的作用下可形成重组 DNA分子用不同限制酶切 DNA分子 制，产生的粘性未端或平末端 D.限制酶和DNA连接酶作用的部位都是磷酸二酯键 一般不相同。另外，不同限制 酶切割形成的黏性末端如果 解析图中①④是由同一种限制酶切割形成的，因此题中 互补，则可以相互重新配对。 DNA片段是由3种限制酶切割后产生的，A正确：②片段是在识 ②当限制酶剪切目的基 GAATTC- 别序列为CTTAAG的限制酶作用下形成的，B错误：连接 因一次时，获得的黏性末端或 平末端有2个，而不是1个， ①④两个片段需要的是DNA连接酶，C错误；限制酶和DNA连 若剪切目的基因两次，共产生4 接酶作用的部位都是两个核苷酸之间的磷酸二酯键，D正确。 个黏性末端或平末端。 答案AD ⊙变式1下面是3种限制性内切核酸酶对DNA分子的 块 识别序列和剪切位点图（箭头表示切点，切出的断面为黏性末 端)。下列相关叙述错误的是()。 ↓GATC-CCGC￥GG-一G￥GATCC 限制酶1 限制酶2 限制酶3 A不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点，体现了酶的 专一性 B.限制酶2和3识别的序列都包含6个碱基对 C.限制酶1和3剪切出的黏性末端相同 D.能够识别和切割RNA分子内一小段核苷酸序列的酶只 有限制酶2 考点2 DNA连接酶一 “分子缝合针” 5年4考 ·核心总结 1.概念：能够将两个DNA片段连接起来的酶。 章难点突破… 2.种类：根据酶的来源不同，DNA连接酶分类如下表。 DNA连接酶及综合比较 (1)DNA连接酶的功能 种类E.coli DNA连接酶 T4DNA连接酶 有个很形象的说法：DNA 来源 大肠杆菌 T4噬菌体 连接酶能将“梯子”两边的“扶 可以连接黏性末端和平末端，但连接平末 特点 只能连接黏性末端 手”的断口处连接起来。实际 端的效率相对较低 上就是在相邻的脱氧核苷酸 105 考点同步解读〉高中生粉学选条性必修3生物技术与工程RJ色 3.作用：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切 之间形成磷酸二酯键，把两条 DNA片段末端之间的缝隙 开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键（不是连接互补的碱基之间 “缝合”起来。 的氢键)，如图所示。 (2)DNA连接酶和限制 酶的比较 ①两者的比较 种类 作用 应月 在DNA片段用于目的 DN