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专题05
生物技术与工程
题型简介
本讲中,基因工程考查频率明显高于其他工程,多结合情景考查基因工程特点、工具、操作程序,尤
其是PCR、基因表达载体的构建及目的基因的检测与鉴定。细胞工程的考查频率仅次于基因工程,考查内
容多涉及动物细胞培养与融合技术,体细胞核移植技术(常渗透考查胚胎工程技术),单克隆抗体的制备及植
物组织培养和体细胞杂交技术。对胚胎工程的考查,经常将胚胎移植、胚胎分割、体外受精等技术渗透于
动物细胞工程或基因工程中进行考查,复习时应尤其重视胚胎移植及干细胞应用技术。
典例在线
(2022山东青岛预测)白叶枯病是造成我国重要粮食作物一水稻严重减产的重要原因之一。某科研
团队将白叶枯病抗性基因X21与质粒重组(图1),利用人工破损处理的水稻幼苗细胞借助根癌农杆菌转化
法获得抗白叶枯病的水稻品种,其中根癌农杆菌侵染植物细胞过程如图2所示,已知不同种限制酶识别序
列不同。请回答:
EcoR I Xa21基因EcoR I
,之
BamH I Sma I Hind I
A】
Vir区
Sma I
教控素项酸
T-DNA
EcoR I Hind II
BamH I
图1
信号分子
诱导Vir区
基因表达
蛋白活花
Virl区
基因表达
Ti质粒
T-DNA的整合
T-DNA
装配
产生单饶
T-DNA
的
核定向
通道复合体
成熟T复合体
水稻幼苗细胞
根癌农杆菌
图2
()构建图1基因表达戟体时,最佳方案是使用
分别处理含Xa2I基因的DNA片段和
Ti质粒,该方案不仅可以避免处理后的白叶枯病抗性基因Xa21和Ti质粒发生
,也能
确保Xa21基因定点插入Ti质粒的
(②)基因表达载体上M抗生素抗性基因的作用是
,T质粒中除图中包含的元件外还
应必备的元件有
(③)由图2可知,水稻幼苗细胞受损后会产生某些信号分子,用于吸引农杆菌移向受损水稻,信号传导
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到根癌农杆菌细胞内激活了T质粒上的Vr区中的多个基因表达,其表达的蛋白质的功能有
(至少写两个)。
农杆菌细胞内形成的成熟T复合体借助细胞膜上的通道复合体定向进入水稻幼苗细胞,最终目标是
(4将含白叶枯病抗性基因X21的水稻幼苗细胞经过
技术可发育成幼苗。经检测,科研人员发
现部分获得X21基因的水稻幼苗不具有抗白叶枯病的能力,原因可能是
标准答案与满分规则
标准答案
评分细则
满分规则
第一空:答案唯一:
(1)BamH1、Hmd(1分)自身
(1)认真审题,找准答题的依据。
第二空:两个采分点,
环化和反向连接(2分)
各1分:第三空:答
例如(1)的第一空,图示中展示
T-DNA片段(1分)
了目的基因和载体上较多的限
案唯
制酶,为什么必须选择
(2)有利于重组Ti质粒的筛选(1分)
第一空:答案唯一:
“BamH I、Hmd”?只有把
复制原点、启动子、终止子(1分)
第二空:答案唯一
第()完整读下来,再仔细观察
(3)组装形成通道复合体、催化产
第一空:按要点分别
图示才能准确确定。
生单链TDNA片段、与单链
得分,最高得2分:
(2)对知识的学习要借助多种信
T-DNA片段结合形成成熟T复合
第二空:答“将Xa21
息载体才能全面深刻地掌握起
体(2分)
基因整合到水稻细胞
来。例如(2)中基因表达载体的
将含有Xa2I基因的T-DNA整合
染色体DNA上”也
构建,不少同学漏掉了“复制
到水稻细胞染色体DNA上(2分)
得2分
原点”,因为复制原点教材文
第一空:答案唯一;
(4)植物组织培养(1分)
字信息中没有说出,但在图示
第二空:必需答全才
Xa21基因转录和翻译异常(1分)》
信息中标出了
能得1分
【解析】()用两种不同的限制酶切制目的基国和质粒,能保证目的基因和质粒的正确连接,避免处理
后的白叶枯病抗性基因X21和Ti质粒自身环化及反向连接,故构建图1基因表达载体时,最佳方案是使
用BamH|和Hindl分别处理含Xa21基因的DNA片段和Ti质粒,同时确保Xa21基因定点插入Ti质粒的
TDNA片段。(②)基因表达载体上的M抗生素抗性基因属于标记基因,其作用是鉴别受体细肥是否含有目的
基因并将含有目的基因的细胞筛选出来。T质粒中除图中的目的基因外,还应有复制原点、启动子、终止
子等元件。(③)当植物体受损伤时,伤口处的细胞会分沁大量的酚类化合物,吸引农杆菌向这些细胞转移,
故这些信号分子可能是酚类化合物。由图2可知,信号传导到根癌农杆菌细胞内激活了T1质粒上的V区
中的多个基因表达,其表达的蛋白质的功能有组装形成通道