1.2.2微生物的选择培养和计数课件-2022-2023学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

1.2微生物的培养技术及应用 1.2.2微生物的选择培养和计数 S金moe的Enteris ⊙tw ●8 Klebshi peumonid 研究背景寻找耐高温的DNA聚合酶 1973年，布鲁克在美国黄石国家公园的一 个热泉中发现了耐热的水生栖热菌，并从这 种菌种提取出耐高温的DNA聚合酶。 讨论：1.筛选水生栖热菌的思路是什么样的? 耐高温的酶寻找耐高温生物体寻找→高温环境（热泉、火山口） 2.为什么水生栖热菌能从热泉中筛选出来呢? 水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存，而绝大多数微生物在此 条件下不能生存。 启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 现学现用 1.在被石油污染的土壤中可以筛选 分解石油微生物 2.在冰川冻土层可以筛选 耐寒 微生物 3.漆酶属于 酶类，分离产漆酶菌株的首沙 生活污 培养基中加氨苄青霉素 培养基应 没有费微背宠来些 件， 有蘭蓬大多 在的细堕被湖潮沈生存，因 过这 个原理从环业中获得某种特定种类的微生物。 圣出抗氨苄青霉素能力的细菌 没有氨苄 具有氨苄 青霉素抗 青霉素抗 性的细菌 性的菌落 选择培养基 人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制 或阻止其他微生物生长。 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类 类型 条件 分离得到的菌种 加入青霉素 酵母菌、霉菌等真菌（青霉素可杀死细蔺） 添动加某种化学物质 高浓度食盐 金黄色葡萄球菌 特殊碳、氮源 石油是唯一碳源 能分解石油污染的微生物 不加碳源 自养型微生物 营养缺陷 不加氮源 固氨菌 选择培养基 思考讨论 尿素[CONH2)2]含氨量高，化学性质稳定，是一种重要的农业氮 肥，尿素不能直接被农作物吸收，土壤中的细菌将尿素分解成NH3, 再被转化为NO3、NH4+等被植物吸收。 土壤中的细菌分解尿素是因为他们能合成脲酶。 CONH2+H,0脲酶2NH+CO2 1.你如何设计培养基配方，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来？ 设计一种选择培养基，用尿素作为唯一氮源，可以将分解尿素的细菌分 离出来。 2.该培养基与普通培养基有哪些共同，点和不同点？ 现学现用 培养基- 蛋白胨⊥ⅱ_10.0g---1.从物理性质来讲，两者属于固体培养基， NaCl5.0g判断依据是_滤凝固剂琼脂_， 琼脂20.0g且比例为~2%_。该类培养基的主 蒸馏水⊥定容到1000mI」要用途为_分离计数。 培养基二 KH_2PO_4一1.4g□2.从用途上来讲，培养基二属于选择培养基， 2.1g_―|目的是为了获得_能_。 琼脂―15.0g中π一的碳源为牛肉膏，氨源为蛋白脉； 蒸馏水_定容到000m1-培养基二的碳源为葡萄糖，氨源为尿素 现学现用 思考： 怎么证明一个选择培养基具有选择性呢？ 应该设置基础培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）或完全培养基作为对 照，若基础培养基或完全培养基中生长的菌落数菌多于该选择培养基， 则该选择培养基具有选择性； 微生物的选择培养 如果想知道1g土壤中有多少能分解尿素的细菌，还需对土壤菌液进 行稀释及科学的微生物数量测定方法-一- 两个基本操作：梯度稀释 和涂布平板 稀释涂布平板法： 将菌液进行一系列的梯度稀释， 然后将不同稀释度的菌液分别涂布到 琼脂固体培养基的表面，进行培养。 稀释度足够高时，能在培养基表面形成单个菌落。 微生物的选择培养 土壤取样 细菌宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大部分分布在 距地表3`8cm的土壤层。铲去表层土3cm左右，取样，将样品装入 事先准备好的信封中。 业业业业 取土样时用的铁铲和 取样袋在使用前都需要灭 菌。操作完成后，一定要 洗手。 微生物的选择培养 样品等梯度稀释 将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀，制成稀 释10倍的土壤菌液。 取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。 1 mL 1mL 1 mL 1mL 1 mL 1 mL 1×1021×1031×1041×1051×106 1×107 10g 1×10 90mL无菌水 9mL无菌水