1.2微生物的培养技术及应用学案2022-2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3

第1章第2节微生物的培养技术及应用 一、微生物的基本培养技术 ,获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提，也是发酵工程的基础。在 实验室培养微生物，一方面要 另一方面要 并将需要的微生物分离出来。 (一)培养基的配制 1、培养基的概念： 人们按照 的不同需求，配置出供其 的营养基质。用以 微生物或 其代谢产物 2、培养基的种类 按物理 液体培养基：不含凝固剂呈液体状态的培养基 (加入凝固剂，如晾脂) 性质分类 固体培养基：呈固体状态的培养基 注：(1)琼脂仅作为凝固剂，不能为微生物提供能量和营养。 (2)扩大培养获得大量菌种时常用 (3)微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长，形成肉眼可见的菌落。 3、培养基的营养构成 虽然培养基的配方不同，但一般都含有、 初 等营养物质。在提供上 述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对 以及 的需 求。例如，在培养乳酸菌时，需要在培养基中添加 :在培养霉菌时，需要将培养基调制 在培养细菌时，需要将培养基调制 在培养厌氧微生物时，需要 (二)无菌技术 获得纯净的培养物的关键是」 ,主要包括 1、消毒与灭菌 消毒 灭菌 较为 的物理、化学或生物等方法杀死物体 ·部分微生物 使用 的理化方法杀死物体内外 的微生物， 消毒法、巴氏消毒法、 消毒法、紫外线消毒法 灭菌、干热灭菌、 灭菌 注意事项： (1)对实验操作的 一、 操作者的衣着和手进行清洁和 (2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行 (3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 附近进行。 (4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 接触。 （三)微生物的纯培养 (1)相关概念 培养物：在微生物学中，将 在合适条件下形成的 的群体成为培养物。 纯培养物：由 所获得的微生物群体成为纯培养物。 1/4 纯培养：获得 的过程就是纯培养。 (2)纯培养的步骤：配置培养基、 等。 (3)实例—酵母菌的纯培养 ①菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基 可以繁殖成 的子细胞群体，这就是菌落。 ②获得单菌落的方法： (3)酵母菌的纯培养步骤 配制培养基：去皮马铃薯200g切块，加水 1000mL,煮烂，用纱布过滤， 加20g葡萄糖，15~20g琼脂 用蒸馏水定容至1000mL。 ①制备培养基{灭菌：配制好的培养基转移到锥形瓶中进 行高压蒸汽灭菌：培养皿进 行干热灭菌。 倒平板：待培养基冷却至50℃左右，在酒 精灯火焰附近倒平板。 ②接种和分离酵母菌：通过接种环在固体培养基表面连 续划线的操作，将聚集的菌种逐步 稀释分散到培养基的表面。 ③培养酵母菌：完成平板划线后，待菌液被培养基吸收， 将接种后的平板和一个未接种的平板倒 置，放人28℃左右的恒温培养箱中培养 24-48h. 思考讨论： 1、到平板时，带平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 2、接种操作时每次划线接种前与接种后都要灼烧接种环或接种针，其目的分别是什么？ 3、接种结束后，为什么要将一个未接种的培养基和一个接种的培养基放在一起培养，未接种的培养基表面 是否有菌落生长很关键。如果有菌落生长，说明了什么？ 二、微生物的选择培养和计数 (一)选择培养基 1、概念：在微生物学中，将 同时 其他种类微生物生长的培 养基，成为选择培养基。 2、原理：人为提供 (包括 、 和等)，同时」 2/4 其他微生物的生长。 (二)微生物的选择培养 1、方法概述：将土样进行充分稀释，然后再将菌液 到制备好的 这样就可以将聚集在 一起的细菌分离开来。 2、操作流程： ①取土样：铲取土样，将样品装入 中。 ②稀释：将10g土样加入盛有90ml 的推形瓶中，充分摇匀。取1ml 加入盛有 的试 管中，依次等比稀释。 I mL I mL I mL I mL 1 mL I mL 1×10 。。”。”▣ 年中和中年果果果 1×101×101×101×101×101×10 90mL无菌水 9mL无菌水 ③取0.1ml菌液，滴加到 ④涂布 将涂布器浸在盛将涂布器放在火焰上灼用涂布器将菌液均匀地涂布 有酒精的烧杯中烧，待酒精燃尽、涂布 在培养基表面。涂布时可转 器冷却后，再进行涂布 动培养皿，使涂布均匀 ⑤培养 待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板 放入 恒温培养箱中1-2天。在涂布有合适 浓度的平板上就可以观察到分离的 3、注意事项 (1)涂布平板的所有操作均在 进行。 (2)将涂布器从酒精中取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然后在放在火焰上灼烧。 (3)不要将 放在盛有酒精的烧杯中，以免引燃酒精。 (三)微生物的数量测定 1、稀释涂布平板法 ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的 来源于样品稀释液中的 通过统计 就能推测出样品中大约含有 ②计数原则：选择菌落数为 的平板进行计数；在同一稀释