2.2.1动物细胞培养和核移植技术课件2020-2021学年高二下学期生物人教版选修3

动物细胞培养 动物细胞融合 生产单克隆抗体 动物细胞核移植 动物细胞工程常用技术 　　其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础. 2.2 动物细胞工程 一.动物细胞培养概念： 1.材料： 2.过程： 3.目的： 4.原理： 形成组织、细胞（不能形成个体） 细胞增殖 动物的组织 动物的组织→分散成单个细胞→放入培养基→细胞生长和增殖 二.动物细胞培养过程： 阅读课本44--46页第一自然段，约3分钟 1.应该选择动物的 组织，原因是 。 A.胚胎 B.幼龄动物 C.性成熟动物 D.老龄动物 2.为什么要将动物组织分散成单个细胞？ 3.方法是 . (1)胰蛋白酶的作用是 。 （2）能否用胃蛋白酶，如若不能，则是因为动物细胞培养的PH为 。 A.2.0 B.7.2--7.4 C.5.0--6.1 D.10.2-11.0 分解蛋白质，使组织分散成单个细胞 A、B B ①能保证细胞所需的营养供应。 ②能保证细胞内有害代谢产物的及时排出。 增殖能力强，分化程度低 （3）细胞膜的主要成份是 ，胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？在使用时应注意什么问题？ 4.制成细胞悬液：将分散的细胞进行 。 5.原代培养：将 放入培养瓶内，置于适宜环境中培养。 (1)用到的培养基是 （固体或液体）培养基。 培养基的成分有 。 蛋白质和磷脂 注意控制时间 稀释 细胞悬液 液体 营养物质，PH等 （2）贴壁生长：①要求培养瓶内表面 。 ②细胞分裂方式是 。 光滑、无毒，易于贴附 有丝分裂 （3）接触抑制： ①概念： ②细胞分裂 。 ③原因是细胞膜上有 （物质）， 具有黏着性。 ④正常细胞原代培养时，出现接触抑制，此时正常细胞会长成 层。 ⑤如若癌细胞原代培养时， （是或否）会出现接触抑制现象，此时癌细胞会长成 层。 停止 糖蛋白 一 否 多 6.传代培养： (1)先用胰蛋白酶等处理 的细胞，再分瓶继续培养。 （2） 代左右时，细胞增殖缓慢，甚至停止。 （3）部分细胞 发生变化，少部分细胞获得不死性，能无限增殖。这些细胞的遗传物质 ，称为细胞系。 贴满瓶壁 10--50 核型 改变 原代培养的细胞一般传至10代左右，细胞生长停滞，大部分衰老死亡，少数细胞能存活并继续传至40-50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞株传至50代后会再次出现停滞，不能再传代，但部分细胞的遗传物质发生了改变，带有癌变特点，可在培养条件下无限制地传下去，这种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。 用于核移植时的供体细胞一般选择10代内的细胞。因为传至10—50代时，部分细胞核型可能会发生变化，其细胞遗传物质可能会发生突变，而10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。 原代培养的特点： ① ， ② 。 归纳 过程 取 的组织、器官 细胞悬浮液 酶 贴满瓶壁的细胞 单个细胞 加入 液 动物胚胎或幼龄动物 胰蛋白 培养 接触抑制 原代 培养(分装前) 1-10代细胞 贴壁生长 原代细胞 培养 加 液 40—50代细胞(细胞株) 未 无限传代（细胞系） 已 培养 胰蛋白 酶 练习：分层P86: 5题。 传代 短期和临时性的保存可以采用一般的低温，如哺乳动物的细胞在4℃左右可存活几十天甚至几个月。 长期的保存方法目前一般采用超低温冻存法，即将细胞和保护剂放入-196 ℃的液氮中进行保存。 三.冷冻和复苏： 2.复苏： 1.冷冻保存： 随时取出迅速放入37℃温水中解冻 保存主要措施：降低温度 目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。 1. 的环境： （1）培养液和所有培养用具进行 处理。 （2）抗生素的作用是 。 （3）应 ，以便清除代谢废物。 2.营养：（1）无机物：无机盐、 。 （2)有机物： 。 注：培养基中添加动物血清的原因是： 四.动物细胞培养的条件 阅读课本46页，约2分钟 血清中含有多种维持细胞正常代谢和生长