内容正文:
《第2章 细胞工程》
第3节 胚胎工程
二 胚胎工程技术及其应用
必会知识 考点梳理拓展延伸易错警示
必会知识一 试管动物技术
1.试管动物技术:是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经移植产生个体的技术。
2.重要应用—良种培育:试管动物技术实现了良种动物的快速大量繁殖。
3.技术手段:该技术首先要做的是体外受精和早期胚胎的培养,然后进行胚胎移植。
必会知识二 体外受精
1.基本步骤:卵母细胞的采集和培养,精子的采集和获能,受精。
2.卵母细胞的采集和培养
采集方法
适用范围
采集过程
采集后的操作
举例
输卵管冲取法(也叫超数排卵法)
实验动物
利用促性腺激素促使雌性动物排出更多的卵子,从输卵管中冲取卵子。
可直接与获能
的精子在体外
受精
小鼠、兔、猪、羊等
已屠宰动物卵巢内采集
大型动物或大家畜
从已屠宰的雌性动物体内摘取卵巢,再从卵巢中采集卵母细胞
采集的卵母细胞都要在体外经人工培养成熟后,才能与获能的精子受精
牛
活体采卵
借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等工具,直接从活体动物卵巢中吸取卵母细胞
3.精子的采集和获能
(1)收集精子的方法:假阴道法(牛、马等体型大的动物)、手握法(猪、犬等体型较小的动物)、电刺激法(野生或经济动物)。
(2)使精子获能的方法:直接利用雌性动物的生殖道使精子获能:将精子培养在人工配制的培养液中使其获能等。获能液的成分因动物种类不同有所差异,常见的有效成分有肝素、Ca2+载体等。
4.受精:获能的精子和培养成熟的卵子,一般情况下都可以在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。精子和卵子一般要放在培养液内共同培养一段时间才能完成受精。
必会知识三 胚胎的早期培养
1.培养液的成分
(1)盐类:无机盐和有机盐类。
(2)营养物质:氨基酸和核苷酸。
(3)调节物质:维生素和激素。
(4)天然物质:血清。
2.胚胎早期培养的目的
(1)精子与卵子在体外受精后,应将受精卵移入发育培养液中继续培养,以检查受精状况和受精卵的发育能力。
(2)当胚胎发育到适宜的阶段时可将其取出向受体移植或冷冻保存。
必会知识四 胚胎移植
1.胚胎移植:是指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内,使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体”,接受胚胎的个体叫“受体”。
2.胚胎移植的实质:胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移,是生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程。
3.胚胎移植的生理学基础
(1)供体与受体有相同的生理环境。哺乳动物发情排卵后,不管是否妊娠,在一段时间内,同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的,这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。
(2)早期胚胎处于游离状态。哺乳动物的早期胚胎形成后,在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系,而是处于游离状态,这就为胚胎的收集提供了可能。
(3)受体对外来胚胎的认可。大量的研究已经证明,受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应,这为胚胎在受体内的存活提供了可能。
(4)供体胚胎与受体正常联系的建立。供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系,但移入受体的供体胚胎的遗传特性,在孕育过程中不受任何影响。
4.胚胎移植的基本程序
以家畜的胚胎移植为例,胚胎移植主要包括供体、受体的选择和处理,配种或人工授精,胚胎的收集、检查、培养或保存,胚胎的移植,以及移植后的检查等步骤。以牛胚胎移植为例,如图所示。
5.胚胎移植的意义
(1)充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力,大大缩短了供体本身的繁殖周期,增加供体一生繁殖后代的数量。
(2)胚胎移植作为胚胎工程的最终技术环节,还将推动胚胎工程其他技术的研究和应用。
必会知识五 胚胎分割
1.胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等,经移植获得同卵双胎或多胎的技术。胚胎分割可以看作动物无性繁殖或克隆的方法之一,因为来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质。
2.主要仪器设备:体视显微镜和显微操作仪。
3.选用的胚胎:胚胎分割应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚。
4.基本操作程序
(1)选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚,将其移入盛有操作液的培养皿中。
(2)在显微镜下用分割针或分割刀将胚胎切开,吸出其中的半个胚胎,注入预先准备好的空透明带中,或直接将裸半胚移植入受体。
(3)还可用分割针分割滋养层,做DNA分析鉴定性别。
5.胚胎分割的意义以及现状
(1)可以促进优良动物品种的繁殖,产生的遗传性状相同的后代是进行遗传学研究的宝贵材料。
(2)在胚胎移植前,进行性别鉴定、遗传病筛查等,对于人工控制动物