2.2动物细胞工程第1课时课件2022-2023学年高二下学期生物人教版选修3

第2节 动物细胞工程 本节内容 动物细胞工程 动物细胞培养（基础） 动物细胞融合技术 动物体细胞核移植等 在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。 可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增； 目前，科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养，以获得适合临床上使用的人造皮肤； 通过细胞培养构建的人造皮肤 克隆皮肤 讨论： 怎样才能获得大量的自体健康皮肤？ 能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤？ 从社会中来 第1课时 1.动物细胞培养的条件 【动物细胞培养】从动物体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖。 培养对象：胚胎或幼龄动物的细胞较成体的细胞更易培养 地位：动物细胞工程的基本技术 原理：细胞增殖（有丝分裂） 1.动物细胞培养的条件 动物细胞培养 所需的基本条件 其他条件 营养条件 动物细胞培养的条件 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 糖类、 氨基酸、 无机盐、 维生素…… 动物细胞培养需要满足的条件 1.动物细胞培养的条件 ①营养：糖类、氨基酸、无机盐、维生素等 【合成培养基】将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制的培养基。 培养基的物理性质：培养动物细胞一般使用液体培养基，也称为培养液。 动物血清：含人类未知、细胞生长增殖所必需的物质。 1.动物细胞培养的条件 ②无菌无毒 对培养液和所有培养用具进行灭菌处理；在无菌环境下进行操作 定期更换培养液 以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害 防止培养过程中的微生物污染 ③温度、pH和渗透压 维持细胞正常的形态和功能 温度：36.5±0.5℃ pH：7.2~7.4 适宜的渗透压 ④气体环境 O2：细胞代谢所必需 CO2：维持培养液的pH值 95%CO2+5%O2的CO2培养箱 2.动物细胞培养的过程 取材：幼龄动物的组织细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养 原因：细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和增殖 类型：①悬浮在培养液中生长增殖 ②贴附于某些基质表面才能生长增殖（细胞贴壁） 因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻(贴壁细胞还会发生接触抑制） 悬浮生长类：直接用离心法收集。 贴壁生长类：重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集。 取动物组织块 分散成单个细胞 制成细胞悬液 加培养液 原代培养 传代培养 （分瓶培养） CO2培养箱 方法：机械方法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理 2.动物细胞培养的过程 取动物组织块 分散成单个细胞 剪碎 胰蛋白酶处理 制成细胞悬液 加培养液 原代培养 传代培养 （分瓶培养） 幼龄动物的组织、器官（细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养） ①从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和增殖； ②能使细胞与培养液充分接触，更易进行物质交换 ①机械法②用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间。 不可以；胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性，多数动物细胞培养的适宜pH为7.2-7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性。 可以用胃蛋白酶处理吗？为什么？ 为什么要将组织分散成单个细胞？ 2.动物细胞培养的过程 取动物组织块 分散成单个细胞 剪碎 胰蛋白酶处理 制成细胞悬液 加培养液 原代培养 传代培养 （分瓶培养） 原代培养 ①悬浮生长类：能够悬浮在培养液中生长增殖，会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。 ②贴壁生长类：大多数需要贴附于某些基质表面才能生长增殖（细胞贴壁）；除受密度、有害代谢物、营养物质影响外，还会发生接触抑制。 由于细胞之间有接触抑制的特性，一般的正常细胞并不重叠干其他细胞之上生长，而是单层生长。 癌细胞由于无接触抑制而能够继续移动和增殖，导致细胞向三维空间扩展，发生堆积。 是否接触抑制可作为区别正常细胞与癌细胞的标志之一。 2.动物细胞培养的过程 取动物组织块 分散成单个细胞 剪碎 胰蛋白酶处理 制成细胞悬液 加培养液 原代培养 传代培养 （分瓶培养） 圆球形细胞刚开始 铺展贴壁生长（100×） 培养的动物细胞贴壁生长 并进行有丝分裂（100×） 细胞单层贴壁生长铺满瓶壁后出现接触抑制（100×） 先收集细胞，制成细胞悬液，再分瓶培养 a.悬浮生长类：直接用离心法收集。 b.贴壁生长类：重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集。 2.动物细胞培养的过程 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 培养基性质 培养基特有成分 培养结果 培养目的 相同点