2.2动物细胞工程(第1课时)课件-2022-2023学年高二下学期生物人教版(2019)选择性必修3

2023-02-20
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第1节 动物细胞工程 (第一课时-动物细胞培养) 第二章 细胞工程 希普:首例胚胎移植成功 哈里森:首创动物组织体外培养法 张明觉:发现哺乳动物精子获能现象 格登、童第周:体细胞核移植成功 试管家兔诞生 米尔斯坦和科勒:创立单克隆抗体技术 胚胎分割移植成功 埃文斯:成功分离和培养小鼠的胚胎干细胞 克隆羊多莉诞生 山中伸弥:获得诱导多能干细胞 单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿诞生 我国科学家首次培育了体细胞克隆猴 1890年 1907年 1951年 1958年 1959年 1975年 1978年 1981年 1996年 2006年 2014年 2017年 本节聚焦 1.动物细胞培养需要哪些基本条件? 2.动物细胞培养的基本操作过程是什么? 3.怎样客观分析干细胞在临床上的应用所产生的效益与风险? 【从社会中来】P43 在治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。 讨论:异体移植面临的问题: 。 供体器官短缺、免疫排斥等 获得大量的自体健康皮肤的方法: 。 取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增; 皮肤干细胞培养(研究中) 通过细胞培养构建的人造皮肤 新课引入 通过细胞培养构建的人造皮肤 在治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。那么, 怎样才能获得大量的自体健康皮肤?能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤? 【提示】可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增。目前,科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养,以获得适合临床上使用的人造皮肤。 新课引入 动物细胞融合 动物细胞培养 动物体细胞核移植 动物细胞工程 基础 新课引入 一、动物细胞培养 1.概念:从动物机体中取出相关组织,将它们分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖的技术。 2.原理:细胞增殖 3.培养终点:细胞 动物细胞培养 所需的基本条件 一般来说,动物细胞培养(模拟体内细胞正常生长增殖的环境)需要满足以下条件: 营养条件 其他条件 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 糖类、氨基酸、无机盐、维生素…… 二、动物细胞培养的条件 将细胞所需的营养物质按照种类和所需量严格配制而成的培养基,称为合成培养基 使用合成培养基时,(因为对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚)通常需要加入血清等天然成分 培养动物细胞一般使用液体培养基,也叫培养液 二、动物细胞培养的条件 营养 为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清? 1、血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等, 2、氨基酸有多种,是细胞合成蛋白质的基本成分,其中有些氨基酸动物细胞本身不能合成(称为必需氨基酸),必须由培养液提供。 3、血清激素有胰岛素、生长激素等及多种生长因子;血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质,这是细胞生长和增殖所必需的,能促进细胞的生长、增殖和贴附。 4、因此,细胞培养时,要保证细胞能够顺利生长和增殖,一般需添加10%~20%的血清。 11 二、动物细胞培养的条件 II.无菌、无毒的环境 无菌: ①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理 ②在无菌环境下进行操作 定期更换培养液,(清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害) 无毒: 二、动物细胞培养的条件 III.温度、pH和渗透压 哺乳动物多以(36.5±0.5)℃ 温度: pH: 多数细胞生存的适宜pH在7.2~7.4 渗透压: 需要考虑的一个重要环境参数 培养瓶 二、动物细胞培养的条件 IV.气体环境 O2: 细胞代谢所必需的 CO2: 维持培养液的pH (95%空气和5% CO2 ) 微生物培养中的作用不同(为自养型微生物提供碳源) CO2培养箱中培养 动物 组织块 分散成 单个细胞 机械法 胰蛋白酶 胶原蛋白酶处理 思考1.常用胰蛋白酶分散细胞,这说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗? 说明细胞间的物质主要是蛋白质。 胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,当pH大于6时,胃蛋白酶就失去活性,多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性,所以用胃蛋白酶不行。 三、动物细胞培养的过程 动物 组织块 分散成 单个细胞 机械法 胰蛋白酶 胶原蛋白酶处理 思考2.用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理组织块,使组织分散成单个细胞的目的是什么?

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