2023届高三一轮复习生物：基因工程课件

基因工程：是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品。又叫 重组DNA技术 1.操作环境： 2.原理： 3.操作对象： 4.操作水平： 5.结果： 体外环境 基因 分子水平 基因重组 赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品 定向改造生物性状；克服远缘杂交不亲和障碍 6.意义： 基因工程 第36讲 基因工程 重组DNA技术的基本工具 教学目标 1、概述重组DNA技术的三个基本工具及其作用 工具 分子手术刀 分子缝合针 分子运输车 限制性内切核酸酶： DNA连接酶： 载体：质粒 准确切割DNA分子 将DNA片段连接起来 将体外重组好的DNA分子导入受体细胞 重组DNA技术的基本工具 来源：从微生物（主要是原核生物）体内分离出来 重组DNA技术的基本工具——限制酶 Q1:限制酶存在于原核生物中的作用是什么? 原核生物容易受到外源DNA的入侵;限制酶可切割外源DNA,使之失效,保证自身的安全 Q2:为什么限制酶不切割细菌本身的DNA分子? 不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰 Q3:限制酶命名法? 流感嗜血杆菌的d菌株( Haemophilus influenzae d )中先后分离到3种限制酶，则分别命名为: HindⅠ、HindⅡ、 HindⅢ 原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵。限制酶就是细菌的一种防御性工具，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，从而达到保护自身的目的。 5 功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 重组DNA技术的基本工具——限制酶 大多数限制酶的识别序列由___个核苷酸组成，也有少数限制酶的识别序列由___个、___个或_________的核苷酸组成 6 4 8 其他数量 切割结果：形成平末端或黏性末端 形成的黏性末端（从5’往3’读）为_____ 两个黏性末端有___个游离的磷酸基团 AATT 2 重组DNA技术的基本工具——限制酶 产生相同的黏性末端一定都是用同一种限制酶切割 不同DNA分子用同一种限制酶切割形成的黏性末端都相同 判断 √ × 例1：某线性DNA分子含有3000个碱基对(bp)，先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如表所示。限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示。下列有关说法正确的是(　　) a酶切割产物(bp) b酶再次切割产物(bp) 1600；1100；300 800；300 A.在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个 B.a酶与b酶切出的黏性末端不能相互连接 C.a酶与b酶切断的化学键不相同 D.用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后， D －TCTAGG－ －AGATCC－ 序列会明显增多 重组DNA技术的基本工具——限制酶 选择限制酶切割位点的基本原则： ①切割目的基因时： 。 ②切割质粒时： 。 能切下目的基因且不破坏目的基因 至少保留一个完整的标记基因，便于筛选 重组DNA技术的基本工具——限制酶 如果用一种限制酶分别切割目的基因和质粒，再用DNA连接酶处理后会出现几种产物？(只考虑两两结合) 目的基因—载体连接物、载体—载体连接物、目的基因—目的基因连接物 单酶切缺点：目的基因、质粒自身环化、质粒与目的基因反向连接 推荐：双酶切法 在基因工程中，已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据下图示判断下列操作错误的是( ) A.质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割 B.用限制酶切割获得目的基因时，有四个磷酸二酯键被水解 C.限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ切割后获得的黏性末端相同 D.质粒中标记基因便于筛选出目的基因已经表达的细胞 E.用酶I和酶II形成相同的黏性末端，且用DNA连接酶连接的重组DNA还能用上面两种酶切割 DE 重组DNA技术的基本工具——限制酶 用图2中的人乳铁蛋白目的基因和图1所示的质粒构建重组质粒时，选用的限制酶是 　 （从“EcoRⅠ”、“BamHⅠ/HindⅢ”、“SmaⅠ/HindⅢ”中选择）．不能选择其他限制酶的理由分别是：