1.2.1微生物的基本培养技术 课件 2022—2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3

葡萄酒、酸菜发霉变质 食用自制酸奶导致肠胃不适屡见不鲜 怎样能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？ ①制作工具和原料灭菌 ②接种单一的菌种 ③控制发酵条件 ④避免杂菌进入 微生物的培养技术 1 培养基的配置 2 无菌技术 3 微生物的纯培养 个体无法用肉眼观察的微小生物 培养基的配置 1 培养基的配置 1.培养基: 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 2.培养基的作用: 用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。 3.培养基的类型: (1)按物理性质：液体培养基、固体培养基、半固体培养基 (2)按成分组成：天然培养基、合成培养基。 (3)按目的用途：选择培养基、鉴别培养基。 工业生产 微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 观察微生物的运动、分类鉴定 工业生产 分类、鉴定 培养、分离 鉴定 菌落 大小、形状、颜色 4.培养基的基本成分: 碳源、氮源、无机盐、水 特殊条件： pH、O2和特殊营养物质 乳酸杆菌： 添加维生素 霉菌： 调至酸性 细菌： 调至中性或弱碱性 厌氧微生物： 无氧条件 （生长因子、氨基酸、维生素、碱基等） 培养基成分 提供的主要营养 牛肉膏 5g 碳源、氮源、磷酸盐和维生素 蛋白胨 10g 碳源、氮源和维生素 NaCl 5g 无机盐 H2O 定容至1000mL 氢元素、氧元素 牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌） 2 无菌技术 1.消毒： 是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。 2.灭菌： 是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 休眠体 生殖细胞 -----与消毒最本质区别 消毒 煮沸消毒 巴氏消毒 化学药剂 紫外线 100℃煮沸5～6min， 家庭餐具等生活用品 62～65℃煮30min或80-90℃煮30s-1min， 牛奶等不耐高温的液体 擦拭等,如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源 紫外线照射30min， 接种室、接种箱，超净工作台 灭菌 灼烧灭菌 干热灭菌 湿热灭菌 接种的金属工具、接种时用的试管口或瓶口等 直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧 耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等 物品放入干热灭菌箱,160～170℃加热2～3h 培养基及多种器材和物品 高压蒸汽灭菌锅内,100kPa,温度121 ℃,15～30min 干热灭菌箱 高压蒸汽灭菌锅 灼烧灭菌 3 微生物的纯培养 1.培养物： 3.纯培养： 2.纯培养物： 在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的培养。 由单一个体繁殖所获得的微生物群体。 获得纯培养物的过程就是纯培养。 03 【探究 实践】 酵母菌的纯培养 1.实验原理： 鉴定菌种的重要依据： 形状、大小、颜色、 如何鉴定哪个菌落是酵母菌？ 问 获得单菌落的方法？ 问 ①平板划线法 ②稀释涂布平板法 微生物群 分散或稀释 单个细胞 单个菌落 繁殖 03 【探究 实践】 酵母菌的纯培养 接种和分离酵母菌 培养酵母菌 灭菌 倒平板 配制培养基 制备培养基 03 酵母菌的纯培养 A、配制培养基 1、制备培养基 灭菌之前先调PH 03 B.灭菌 培养基 高压蒸汽灭菌锅 培养皿 干热灭菌箱 100kPa 121℃ 15~30分钟 160~170℃ 2h 03 C、倒平板 待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。 避免周围环境中微生物的污染 防止在冷凝后形成的水珠滴落在培养基上，污染培养基，破坏菌落 2、接种和分离 ①灼烧接种环，直至接种环金属丝烧红 ⑥在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划3-5条平行线，盖上皿盖。 ⑤试管口通过火焰，并塞上棉塞 ②在火焰旁冷却接种环，拔出酵母菌培养液试管的棉塞 ③试管口通过火焰 ④在火焰附近用接种环蘸取一环菌液 ⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。 注意不要将最后一次划线与第一次的划线相连 灭菌 无菌环境 防止高温使菌种死亡 灭菌 无菌环境 1 2 3 4 5 【平板划线法注意事项】 1.接种环只蘸一次菌液，但要在培养基不同位置连续划线多次； 2.划线首尾不能相接； 3.每次划线前灼烧接种环进行灭菌； 4.划线操作结束后，仍需灼烧接种环。 连续划线法 分区划线法 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？ 在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 杀死接种环上原有微生物 取菌种前灼烧： 每次划线前灼烧： 杀死上次划线时残留菌种，使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端，从而使每次划线时菌种数目逐渐减少，直至得到单个细胞 接种结束后灼烧： 杀死接种环上残留的菌种，避免