1.2微生物的培养技术及应用第4课时课件2022-2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3

选择性必修三 授 课 人: 罗桂莲 授课时间：2023.2.14 第一章 第2节微生物的培养技术及应用 （第4课时） 学习目标 01 02 运用生物与环境相适应的观点来理解选择培养的原理 通过调整培养基的配方来有目的地培养某种微生物 03 三、微生物的数量测定 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过计数平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 1.稀释涂布平板法 1.稀释涂布平板法 2.显微镜直接计数法 ——间接计数法 ——直接计数法 计数原则: 为了保证结果准确，选择 个菌落的平板进行计数； 在同一稀释度下至少取 个平板进行重复计数取其 ； 分析实验结果时，要考虑重复组结果是否接近，如果相差太大，意味着操作有误，需重新实验。 3 平均值 30-300 《学案》典例研析P21 【例6】稀释涂布平板法不仅是分离和纯化微生物的重要方法,也是测定微生物数量的重要方法。用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在统计数据时应 ( ) A.随机抽取某个稀释度的培养基,统计菌落数 B.将不同稀释度的3个培养基上的菌落数求和 C.将相同稀释度的全部培养基上的菌落进行计数 D.抽取相同稀释度的菌落数在30~300的3个培养基统计菌落数后求平均值 D 5 统计的菌落往往比活菌的实际数目 ； 统计的结果一般用 而不是活菌数来表示； 恰当的稀释度、涂布是否均匀是成功统计菌落数目的关键。 结果分析: 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 03 1.稀释涂布平板法 三、微生物的数量测定 低 菌落数 6 03 计算公式: 每g样品中的菌落数＝ (C÷V)×M M代表稀释倍数 C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数 V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL) 例：某同学在稀释倍数为106 的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234，那么每g样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL) ( ) A. 2.34×108 B. 2.34×109 C. 234 D. 23.4 （234÷0.1）×106=2.34×109 答 B 例：甲同学做此实验在稀释倍数105获得3个平板，菌落数分别是80、90、100，涂布平板时均使用0.1ml菌液，试计算每克土壤中可以分离尿素的细菌数目？ （80+90+100）/3 0.1 × 105 =9 ×107个 1.稀释涂布平板法 三、微生物的数量测定 7 03 2.显微镜直接计数法 血细胞计数板： 细菌计数板： 常用于相对较大的酵母菌细胞、霉菌孢子等的计数。 对细菌等较小的细胞进行观察和计数。 缺点： ①不能区分死菌和活菌→偏大（计活菌数和死菌数的总和） ②不适于对运动细菌的计数。 ③个体小的细菌在显微镜下难以观察。 优点：快速、直观 三、微生物的数量测定 《学案》典例研析P21 【例5】下列关于酵母菌溶液计数方法的描述,错误的是 ( ) A.可以用显微镜直接计数,需要血细胞计数板,但数据可能偏大 B.也可以用培养菌落的方法间接计数,但数据可能偏大 C.无论用哪种方法计数,都必须进行浓度梯度稀释 D.无论用哪种方法计数,都必须多次计数求平均值 B 1.提出问题 土壤中含有能分解尿素的细菌，我们如何分离它们？ 每克土壤样品究竟含有多少这样的细菌？ 利用以“尿素作为唯一氮源”的选择培养基，可以分离。 2.做出假设 3.实验设计 实验步骤 土壤 取样 制备 培养基 样品稀释 与取样涂布 微生物的 培养与观察 探究·实践 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 实验原理 绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有 的微生物才能分解尿素，利用以 的选择培养基，可以从土壤中分离出 。 CO(NH2)2+H2O 脲酶 2NH3+CO2 能合成脲酶 尿素作为唯一氮源 分解尿素的细菌 ①培养基的制备 制备选择培养基（尿素为唯一氮源） 制备牛肉膏蛋白胨培养基 对照作用 思考1.为什么还要制备牛肉膏蛋白胨培养基？ 探究·实践 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 4.进行实验 ②土壤取样 A 取样地： 土壤中。 B 取样：铲去表层土（一般3cm左右）。 细菌绝大部分分布在距地表 的土壤层。 探究·实践