内容正文:
第2节 微生物的培养技术及应用
一 微生物的基本培养技术
第一章 发酵工程
01
培养基的配制
02
无菌技术
03
微生物的纯培养
从社会中来
食用自制酸奶导致肠胃不适的事件屡见不鲜。
19世纪中期,法国酿酒业曾一度遭到毁灭性打击,生产的葡萄酒出现了变酸变味的怪事…
3
微生物的纯培养
无菌技术
培养基的配制
①为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件;
②确保其他微生物无法混入,并将需要的微生物分离出来。
实验室
培养微生物
的要求
防止杂菌污染,获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提,也是发酵工程的重要基础。
微生物的基本培养技术
微生物
难以用肉眼观察的微小生物的统称。
无细胞结构
原核细胞
真核细胞
微生物
病毒:SARS病毒、新冠病毒等RAN病毒;噬菌体等DNA病毒
细菌:蓝细菌、大肠杆菌、乳酸菌等;
放线菌:链霉菌等
真菌:酵母菌、毛霉等;
原生生物:草履虫、变形虫等
01
培养基的配制
培养基:
人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出的供其生长繁殖的营养基质。
工业生产、连续培养 用于菌种分离、鉴定、计数
加入凝固剂(琼脂)
培养基的配制
划分标准 培养基种类 特点 用途
物理性质
化学成分
用途/功能
不加凝固剂 震荡培养就是摇床培养
加凝固剂,如琼脂
工业生产
观察微生物的运动、
分类鉴定
微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种
含化学成分不明确的天然物质
工业生产
培养基成分明确
分类、鉴定
允许特定种类微生物生长,抑制其他种类微生物生长
选择、分离出特定微生物
加入能与目的菌的代谢产物发生显色反应的指示剂
鉴别不同种类微生物
选择培养基
液体培养基
半固体培养基
固体培养基
天然培养基
合成培养基
鉴别培养基
培养基的配制
培养基中加氨苄青霉素
具有抗氨苄青霉素能力的菌落
培养基
怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌?
培养基的配制
一、概念检测
1. 研究人员用无机盐、琼脂和石油配制的培养基从被石油污染的土壤中筛选出了一种石油降解菌,判断下列相关表述是否正确。
(1)这种培养基是一种选择培养基。( )
(2)利用这种石油降解菌可以降解石油,修复土壤。( )
(3)相对于未被污染的土壤,从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌。( )
√
√
√
培养基的配制
11
处理 目的
选择培养基 加入青霉素
不加氮源
鉴别培养基 加入
伊红-亚甲蓝 大肠杆菌在伊红-亚甲蓝琼脂培养基上生长,菌落深紫色,有金属光泽
分离酵母菌、霉菌等真菌
分离固氮菌
加高浓度食盐
金黄色葡萄球菌
培养基的配制
表1-1 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养组成
组分 含量 提供的主要营养
牛肉膏 5g 碳源、磷酸盐和维生素等
蛋白胨 10g 氮源和维生素等
NaCl 5g 无机盐
H2O 定容至1000ml 水
培养基的配制
一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基
3. 培养基的营养构成:
(1) 基本成分
水
碳源
氮源
无机盐
生长因子(维生素、氨基酸、碱基等)
(2) 其他条件
适宜的 PH
特殊营养物质
O2
④培养厌氧微生物时,需提供_____的条件。
①培养乳酸杆菌时,需在培养基中添加_______;
②培养霉菌时,需将培养基调至_____;
③培养细菌时,需将培养基调至_____________;
维生素
酸性
中性或弱碱性
无氧
缓冲剂(常用KH2PO4或K2HPO4)
培养基的配制
培养基的配制
1. 为什么培养基需要氮源?
培养基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的。
1.培养基
(1)试根据微生物的同化作用类型将微生物进行分类。
分为自养型微生物和异养型微生物。
(2)试从碳源和氮源的角度分析不同类型的微生物所需的培养基成分的特点。
项目 自养型微生物 异养型微生物
碳源 CO2、NaHCO3等无机物 _____________
氮源 _____________________ _____________________
糖类等有机物
NH3、硝酸盐等无机物
尿素、蛋白质等有机物
培养基的配制
3. 培养基的营养构成:
(1) 基本成分
水
碳源
氮源
无机碳源(CO2、NaHCO3等含碳无机物)
有机碳源(糖类、牛肉膏、蛋白质、有机酸、石油等)
无机盐
无机氮源(N2、NH3 、铵盐、硝酸盐等)
有机氮源(尿素、蛋白胨、酵母粉等)
(2) 特殊条件
适宜的 PH
特殊营养物质
O2
可在培养基中加人缓冲剂(常用KH2PO4或K2HPO4)
培养基的配制
(科学思维)下表是某培养基的配方,分析并回答下列问题:
材料 牛肉膏 蛋白胨