1.2.2微生物的培养技术及应用课件2022-2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3

第2节 微生物的培养技术及应用 二 微生物的选择培养和计数 第一章 发酵工程 学习目标 核心素养 1.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。 2．概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。 1.生命观念：各类微生物都能适应其生活环境。 2．科学思维：根据微生物的代谢类型配制选择培养基。 3．科学探究：讨论土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的方法。 思考：如何从自然界中分离出生产所需要的特定微生物？ 自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，更难实现。那么我们又如何达成这一目标呢？ 选择性培养基 2 01 选择培养基 02 微生物的选择培养 03 微生物的数量测定 01 选择培养基 1、科学实例：寻找耐高温的DNA聚合酶 1973年，热泉中发现了耐热的水生栖热菌 2、实验室中微生物的筛选: 人为提供____________________的条件（包括_____、_____和_____等）， 同时___________________________。 有利于目的菌生长 抑制或阻止其他微生物的生长 营养 温度 pH 选择培养基 筛选原理：水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存， 而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 5 允许 生长，同时 或 其他种类微生物生长的培养基。 特定种类的微生物 抑制 阻止 类型 条件 分离得到的菌种 改变培养条件 70～80℃的高温 添加某种化学物质 加入青霉素 高浓度食盐 特殊碳、氮源 石油是唯一碳源 营养缺陷 不加碳源 不加氮源 水生栖热菌 酵母菌、霉菌等真菌 金黄色葡萄球菌 自养型微生物 固氮菌 能消除石油污染的微生物 选择培养基 如何设计培养基的配方，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来？ 设计以尿素作为唯一氮源的选择培养基。 CO(NH2)2+H2O 脲酶 CO2+2NH3 KH2PO4 1.4g NaH2PO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素CO(NH2)2 1.0g 蛋白胨 10.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 定容到 1000ml 选择培养基 尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH3，再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。 7 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g 蒸馏水 定容到1000ml KH2PO4 1.4g NaH2PO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素CO(NH2)2 1.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 定容到1000ml 配方①：培养细菌 配方②：培养分解尿素的细菌 （1）从物理性质看此培养基属于哪类？从用途上属于哪类培养基？ 固体培养基。 配方②是以尿素作唯一氮源的选择培养基 （2）此培养基中共有哪些成分？在此培养基中哪些作为碳源、氮源？ 成分： 碳源、氮源、水、无机盐 选择培养基 02 微生物的选择培养 稀释度足够高时，能在培养基表面形成单个菌落。 对土样充分稀释后，将菌液涂布到制备好的选择培养基上。 1g土壤中有多少能分解尿素的细菌？ 稀释涂布平板法 P17 微生物的选择培养 计数 10 稀释涂布平板法的步骤 ②将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。 1×10 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1×102 1×103 1×104 1×105 1×106 1×107 9 mL 无菌水 ①铲取图样，将样品装入纸袋中 90mL 无菌水 取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。 微生物的选择培养 质量=密度*体积。按照水的密度来算，水的密度为1g/cm³，那么1g水的体积等于1g除以1g/cm³，所得结果是1cm³，而1cm³=1毫升，所以1毫升等于1g。 11 稀释涂布平板法的步骤： ③取0.1mL 菌液滴加到培养基表面 1×107 ④将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中 ⑤将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却。 ⑥用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀 微生物的选择培养 稀释涂布平板法 待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入30～37℃的恒温培养箱中培养1～2d，在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的单菌落。 恒温培养箱 微生物的选择培养 03 微生物的数量测定 1