内容正文:
基因工程
3.1DNA重组技术
的基本工具
1
我种的水稻不用撒农药也不会被虫害那该多好啊!
一、基因工程的概念
通俗的说,就是人们按照自己的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放入另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。
目的基因
受体细胞
目的基因
受体
基因工程的别名
操作环境
操作对象
操作水平
原理
步骤
结果
DNA重组技术
生物体外
基因
DNA分子水平
剪切、拼接导入、表达
基因工程的概念
创造出符合人们需要的新的生物类型和生物产品
基因重组
1.基因工程中分子手术刀的名称是?有多少种?这类酶主要来源于哪里?切割哪种化学键? (识记)
2.限制酶的作用结果是什么?识别序列有什么特点?(应用)
3 . 基因针线或分子缝合针的名称?常见的有哪几种?作用上的区别? (识记)
4.质粒是什么?质粒做载体必须满足哪些条件?(理解)
5.基因工程常用的运载体有哪些? (阐明)
结合课前预习案及教材的相关知识,回答下列思考题:
自学检测
限制酶之初体验
指“ 限制性核酸内切酶 ”
是从原核生物中分离得到的一种酶,可以对来自外界的DNA进行剪切,从而保护自身不受外来基因的污染。又叫“限制酶”。
“ ”
识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。能将外来的DNA切断,由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性核酸内切酶。
4000种。
1、来源:
2、种类:
3、作用:
一、限制性核酸内切酶 ——“分子手术刀”
“ ”
动画演示
限制酶之再体验
1:观察不同限制酶的识别序列与明代蒋一葵的回文诗:莺啼岸柳弄春晴,
晴春弄柳岸啼莺。有什么相似的地方?
2:不同限制酶识别序列是否相同?这体现了酶的什么特点?
问题
(补充)限制酶所识别的序列有什么特点?
限制酶所识别的序列,无论是6个碱基还是4个碱基,都可以找到一条中心轴线,中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。
图1-1 限制酶识别序列的中心轴线
EcoRⅠ
黏性末端
黏性末端
A
A
T
T
C
G
G
C
T
T
A
A
SmaⅠ
平末端 平末端
模拟操作——限制酶切割DNA分子
1. 请找出识别该DNA分子片段的限制酶
3. 在特定位点进行模拟切割
2. 标出该酶所识别的特定核苷酸序列
...ATGAGAATTCATG目的ATGGAATTCCG...
...TACTCTTAAGTAC 基因TACCTTAAGGC...
不是
学生活动 (一)
...ATGAGAATTCATG目的ATGGAATTCCG...
...TACTCTTAAGTAC 基因TACCTTAAGGC...
...ATGAG
...TACTCTTAA
AATTCCG...
GGC...
AATTCATG目的ATGG
GTAC基因TACCTTAA
Q1:剪切下来的末端是平整的吗?
获取目的基因
资料分析
1、噬菌体侵染DNA时,能将DNA注入大肠杆菌。
2、土壤农杆菌侵染植物时,能将其质粒带入到宿主细胞。
3、人造卫星无法自行飞到太空去,火箭却可以,人们把火箭与人造卫星绑定,结果太空有了人造卫星。
问:由此你能想到什么?
①质粒
②噬菌体
③动植物病毒
(1)常用的运载体
二、“分子运输车”——基因进入受体细胞的载体
议一议
2、能否用冠状病毒作为基因载体?
3、作为载体,若没有切割位点将怎样?
4、携带目的基因的载体是否进入了受体细胞,如何鉴定?
5、假如目的基因导入受体细胞后不能复制,将怎样?
1、从化学组成来看,载体应含有什么成分?
双链DNA
不能
不能进行DNA的重组
载体上应有标记基因
可能造成基因丢失
大肠杆菌结构模式图
DNA
质粒载体结构模式图
目的基因
插入位点
氨苄青霉素
抗性基因
复制原点
一个至多个限制酶切割位点
有标记基因
对受体细胞无害
真正被用作载体的质粒,都是进行过人工改造的。
能在宿主细胞中自我复制
或能整合到宿主染色体DNA上
CTTCATG
GAAGTACTTAA
AATTCCCTAA
GGGATT
GG...TCTTAA
AATTCC...AG
TCTTCATG
AGAAGTACTTAA
AATTCCCTAAG
GGGATTC
GG...TCTTAA
AATTCC...AG
二、“分子缝合针”—— DNA 连接酶
基因针线——DNA连接酶