2.2.1动物细胞培养 学案2022-2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3

第2章 第2节 细胞工程 动物细胞工程1 教学目标 1、阐明动物细胞培养的条件和过程 2、简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值 预设及反馈问题 1、动物细胞培养的注意事项？ 2、培养液里需要加什么糖类？ 3、干细胞的分类？ 在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。 可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增； 目前，科学家还在研究皮肤干细胞培养，以获得适合临床上使用的人造皮肤； 讨论： 怎样才能获得大量的自体健康皮肤？ 能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤？ 动物细胞工程 人造皮肤的构建离不开动物细胞的培养。 动物细胞工程 动物细胞培养（基础） 动物细胞融合技术和单克隆抗体 动物体细胞核移植技术和克隆动物 1.动物细胞培养的条件 2.动物细胞培养的过程 3.干细胞培养及应用 动物细胞工程 动物细胞培养：从动物体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖。 动物细胞工程的基本技术 原理： 动物细胞培养 细胞增殖（有丝分裂） 地位： 动物细胞培养的条件 ①营养条件 ②其他条件 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 糖类、氨基酸、无机盐、维生素等 动物细胞培养的条件 动物细胞培养 血清中不仅含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等多种营养物质，还有激素及多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质，能促进细胞的生长、增殖和贴附。 注意：这里的糖类不包括淀粉、蔗糖等 动物细胞培养 ①营养条件 思考1:为什么培养液需要定期更换？ _________________________________________________________ 思考2:如何防止培养过程中的微生物污染？ ____________________________________________ 培养液 所有培养用具 灭菌 无菌环境 定期更换培养液 以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害 在细胞培养液中添加一定量的抗生素 A.无菌、无毒的环境 对______和____________进行_____处理 在________下进行操作 还需要______________ 动物细胞培养 ②其他条件 维持适宜渗透压的目的______________________ 36.5±0.5℃ 7.2-7.4 维持细胞正常的形态和功能 B.温度、pH和渗透压 哺乳动物细胞培养的温度多以______________为宜 适宜的温度 多数动物细胞生存的适宜pH为________ 适宜的pH 适宜的渗透压 动物细胞培养 ②其他条件 含有___________和__________的混合气体的__________ 动物细胞培养所需气体主要有___和____ O2：_____________________ CO2：_________________________ 通常采用_______或____________ O2 CO2 O2是细胞代谢所必需的 维持培养液的pH 培养皿 松盖培养瓶 95%空气 5%CO2 CO2培养箱 C.气体环境 组成 培养容器 培养仪器 动物细胞培养 ②其他条件 CO2培养箱 11 取动物组织 分散细胞 制细胞悬液 原代培养 传代培养 （分瓶培养） 动物细胞培养 动物细胞培养取材： 细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养 取材原因： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 取动物组织 分散细胞 制细胞悬液 原代培养 传代培养 （分瓶培养） 动物细胞培养 ①机械法 ②用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间 Q2:分散成单个细胞的方法 Q1:分散成单个细胞的原因 ①从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起， 彼此限制了生长和增殖； ②能使细胞与培养液充分接触，更易进行物质交换。 取动物组织 分散细胞 制细胞悬液 原代培养 传代培养 （分瓶培养） 动物细胞培养 Q3:胰蛋白酶、胶原蛋白酶的作用是什么？由此说明 动物细胞间的物质是什么成份？ 催化蛋白质水解；动物细胞间的物质主要是蛋白质 Q4:可以用胃蛋白酶分散细胞吗？为什么？ 不能，胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性；多数动物细胞培养的适宜pH为7.2-7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行 取动物组织 分散细胞 制细胞悬液 原代培养 传代培养 （分瓶培养） 动物细胞培养 Q5:酶解法较温和，是否会对动物细胞造成损伤？ 是 使用胰蛋白酶时，要控制好作用时间，因