备课素材：植物组织培养为什么要配制母液 2022—2023学年高二下学期生物学选择性必修三

植物组织培养为什么要配制母液     先看一道试题： 关于制备MS固体培养基的过程，正确的是（　　） A． 在使用提前配制的母液时，可直接用移液管从母液中取 B． 配制母液时，无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍 C． 配制培养基时，灭菌后调节pH值至适宜范围 D． MS培养基的pH要求不太严格，可控制在5～7之间 解析： 制备MS固体培养基过程： 1、计算并填写培养基成分单：计算公式：∨母液=∨配制÷母液倍数 ∨激素=∨配制×培养基中所要求的激素浓度÷激素母液浓度 2．每组取500ml的烧杯一只，加300ml蒸馏水，用天平称4g琼脂放入蒸馏水中，在电炉上加热溶解．称15g蔗糖放入溶解的琼脂中． 3．按配方取出各种母液，放入到溶解后的琼脂和蔗糖溶液中，用玻璃棒搅动混合，并加蒸馏水定容至500ml． 4．用1mol/L的NaOH或1mol/LHCL将PH值调至5.8，可用PH精密试纸或酸度计测定． 5．用培养基分装用具将500ml的培养基分注于15个所选用的培养瓶中． 6．用封口膜、棉塞或其它封口物包扎瓶口，并做好标记． 7．把分装好的培养基及所需灭菌的各种用具、蒸馏水等，放入高压灭菌锅的消毒桶内，将外层锅内加水至水位线．盖好锅盖，上好螺丝，接通电源升温．待锅内温度达100．C（0.05kgf/cm2或0.005MPa）左右时，打开排气阀排净锅内冷空气，然后关闭排气阀，继续加热至温度达到121．C（1.05kgf/cm2或0.103MPa）时，维持20～30min即可切断电源，让锅内气压自然下降，当压力降到零点后，打开排气阀，排出剩余蒸汽，再打开锅盖取出培养基及灭菌物品． A、在使用提前配制的母液时，应在量取前轻轻摇动盛放的瓶子，如发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染，立即淘汰，重新配制，A错误；配制母液时，无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，B正确；配制培养基时，先调节pH值后灭菌，C错误；MS培养基的pH要求严格，需要将PH值调至5.8，可用PH精密试纸或酸度计测定，D错误． 故选：B． 试题中出现了植物组织培养需要配制母液的问题，学生的得分率不高，原因在于没有真正了解植物组织培养的配制情况。2019版高中生物学选择性必修三介绍了配制的母液： 那么，为什么植物组织培养要配制母液呢？ 在植物组织培养过程中，配制培养基是日常必备的工作。为减少工作量，经常使用的培养基，可先将各种药品配成浓缩一定倍数的母液，放入冰箱内保存，用时再按比例稀释，这样比较方便，且精确度高。 母液要根据药剂的化学性质分别配制，一般配成大量元素、微量元素、铁盐、有机物质等母液。 MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的20倍或200倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。 教材MS培养基配方 母液的使用方法 这样每次使用时，取其总量的1/20（50 mL）或1/200（5 mL），加水稀释，制成培养液。 一般需准备四种母液 大量元素母液、 微量元素母液、 铁盐母液、有机化合物母液、激素或生长调节剂。 1、大量元素母液 在配制大量元素母液时，要防止在混合各种盐类时产生沉淀，为此各种药品必须在充分溶解后才能混合。在混合时要注意加入的先后次序，把Ca2+、Mn2+、Ba2+、SO42-、PO43-错开，以免KH2PO4和MgSO4与CaCl2 等发生化学反应，相互结合生成CaSO4、BaSO4、Ca3(PO4)2 沉淀。另外在混合各种无机盐时，其稀释度要大，慢慢混合，同时边混合边搅拌。 2、微量元素母液 在配制微量元素母液时也要注意药品的添加顺序，以免产生沉淀。 3、铁盐母液 铁盐容易发生沉淀，需要单独配制。一般用FeSO4·7H2O 和Na2-EDTA，配成铁盐螯合剂比较稳定，不易沉淀，铁盐放在棕色瓶中保存比较稳定。 4、激素或生长调节剂 多数植物生长调节剂不溶于水或难溶于水，IAA、NAA、IBA、2，4-D等生长素类和GA3，可先用少量0.1molNaOH 或95%酒精溶解，然后再用蒸馏水定容到所需要的体积。KT、6-BA等细胞分裂素类则可用少量1mol/LHCl加热溶解，然后加水定容。植物生长调节剂母液可以在2-4的冰箱中保存。 配制好的植物生长调节剂母液，也应在瓶上贴上标签，注明名称、浓度、配制日期，以便配制培养基基时计算，准确量取。 配制母液注意事项 母液要用蒸馏水配制，药品应选用纯度较高的化学纯CP或分析纯AR，以免有杂质对培养物造成不利影响。药品的称量及定容都要准确，在称量时不同的化学药品需使用不同的药勺，避免药品的交叉污染和混杂，每称好一种药剂应立即作一记号，以免重复或遗漏。各种药品先以少量水让其充分溶解，