内容正文:
第2节 微生物的培养技术及应用(第2课时)
【学习目标】
1.概述培养基的配制方法和微生物纯培养的基本操作要求,进行酵母菌的纯培养。
2.阐明微生物选择培养的原理。
3.进行土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。
【知识梳理】
1.概念:将接种于培养基内,在合适条件下形成的含有特定种类微生物的群体称为培养物。由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物,获得纯培养物的过程就是纯培养。
2.微生物的纯培养步骤(以酵母菌的纯培养为例)
(1)微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。
(2)菌落的概念:分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。
(3)接种方法:最常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。
(4)平板划线法
①原理:通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养,可以分离得到单个菌落。
②操作
(5)方法步骤
【课后训练】
一、单选题
1.以氮源设计选择培养基,下列叙述错误的是()
A.培养基中以尿素为唯一氮源,分离的微生物一定是分解尿素的微生物
B.培养基中以NH3为唯一氮源可分离硝化细菌
C.培养基中无氮源,可分离固氮微生物
D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养细菌后,指示剂变红色,可判断该细菌能分解尿素
2.如图为分离和纯化分解甲醛的细菌的实验过程,其中LB培养基能使菌种成倍扩增,以下说法正确的是( )
A.需要对活性污泥作灭菌处理
B.②中LB培养基只能以甲醛为唯一碳源
C.目的菌种异化作用类型为厌氧型
D.经⑤处理后,应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养
3.某同学利用选择培养基成功分离出了土壤中的自生固氮菌,得到了如图所示的实验结果,以下说法正确的是( )
A.该实验使用了划线法接种
B.该实验使用了液体培养基
C.该实验使用了无碳培养基
D.该实验使用了无氮培养基
4.如表所示为某培养基的配方,下列叙述错误的是( )
成分
NaNO3
K2HPO4
MgSO4·7H2O
(CH2O)
蒸馏水
青霉素
含量
3 g
1 g
0.5 g
30 g
定容至1 000 mL
0.1万单位
A.根据物理性质划分,该培养基属于液体培养基
B.微生物无法在该培养基表面形成肉眼可见的菌落
C.根据培养基的配方可知,该培养基培养的微生物的同化作用类型是异养型
D.固体培养基中加入少量水即可形成液体培养基
5.下列有关培养基的叙述,错误的是( )
A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质
B.培养基只有两类:液体培养基和固体培养基
C.培养大肠杆菌的培养基中必须添加有机碳源
D.微生物在固体培养基表面生长可形成肉眼可见的菌落
6.下表中是某种微生物的培养基配方,下列叙述错误的是( )
成分
KNO3
NaH2PO4
FeSO4
MgSO4·7H2O
葡萄糖
水
青霉素
含量
4 g
3 g
0.01 g
0.48 g
30 g
1000 mL
0.1万单位
A.该培养基的碳源是葡萄糖,氮源是KNO3
B.该培养基可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌
C.该培养基属于固体培养基,可用于微生物的分离
D.该培养基可用来筛选抗青霉素的微生物
7.下列关于微生物培养和利用的叙述,错误的是( )
A.接种前要了解固体培养基是否被污染可接种蒸馏水来培育检测
B.接种时连续划线的目的是将聚集的菌体逐步稀释获得单个菌落
C.以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌
D.利用刚果红培养基上是否形成透明圈可筛选纤维素分解菌
8.某实验小组探究大蒜汁对枯草芽孢杆菌的抑制作用,与实验操作有关的叙述不正确的是( )
A.称量、溶化和倒平板都必须进行无菌操作
B.吸取适当稀释度的菌悬液滴在平板上并涂布均匀
C.分别将浸于大蒜汁和无菌水的滤纸片贴在平板不同位置
D.将平板倒置放入适宜温度的恒温培养箱中培养
9.微生物培养时常用到无菌技术避免杂菌污染,相关叙述正确的是( )
A.无菌技术包括对操作者的衣着和手进行灭菌
B.倒平板时应该把培养皿盖完全打开,以免培养基溅到培养皿盖上
C.配置好的培养基应放入干热灭菌箱中进行灭菌
D.接种前后接种环都必须灼烧灭菌
10.如图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为1→2→3→4→5,下列说法正确的是( )
A.操作前要将接种环用酒精消毒
B.划线操作须在酒精灯火焰附近进行
C.只有在5区才可以得到所需菌落
D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都不需要对接种环灭菌
二、填空题
11.具体操作
(1)对实验操作的_______、操作者的衣着和手进行清洁和__