1.2.2 微生物的选择培养和计数-【实践教学】2022-2023学年高二生物同步优质课件（人教版2019选择性必修3）

第1章 发酵工程 第2节 微生物的培养技术及应用 ——微生物的选择培养和计数 1 发酵工程 目录 /CONTENTS 01 02 03 选择培养基 微生物的选择培养 微生物的数量测定 2 自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。 稀释涂布平板法 呈现的杂菌群 从社会中来 从社会中来 4 从社会中来 科学实例：寻找耐高温的DNA聚合酶 美国黄石公园 筛选原因： 因为热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物，而水生栖热菌能在70-800C高温条件下生存。 1966年，布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的水生栖热菌，并分离到耐高温的DNA聚合酶。 耐高温的酶 耐高温生物体 高温环境（热泉、火山口） 寻找 寻找 PCR是一种在体外DNA复制的技术，此项技术要求使用耐高温（930C）的DNA聚合酶。 5 启示：根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 耐寒微生物 耐热微生物 石油分解菌 同理： 人为提供有利于目的菌生长的条件（包括营养、温度和PH）等，同时抑制或阻止其他微生物生长。 选择培养基 适用实验室微生物的筛选。 6 01 选择培养基 1.概念: 2.类型: 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。 类型 条件 分离得到的菌种 改变培养条件 70～80℃的高温 添加某种化学物质 加入青霉素 高浓度食盐 特殊碳、氮源 石油是唯一碳源 营养缺陷 不加碳源 不加氮源 水生栖热菌 酵母菌、霉菌等真菌 金黄色葡萄球菌 能消除石油污染的微生物 自养型微生物 固氮菌 发酵工程 +氨苄青霉素 具有抗氨苄青霉素能力的菌落 没有氨苄青霉素抗性的细菌 选择培养基 培养基+氨苄青霉素 培养基 没有抗氨苄青霉素能力的菌落被淘汰 怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌? 8 01 选择培养基 尿素的立体结构 【思考·讨论】 尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。 尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH3，再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。 而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶。 脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可以为细菌生长的氮源。 CO(NH2)2 脲酶 + H2O + CO2 2NH3 发酵工程 9 01 选择培养基 2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？ 【思考·讨论】 除以尿素作为唯一氮源外，该培养基的其他营养成分与普通培养基基本相同。 问 在选择培养基中，以尿素作为唯一氮源，只有能合成脲酶的细菌才能生长发育繁殖。 1.将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 问 发酵工程 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g 蒸馏水 定容到1000ml 培养基一 KH2PO4 1.4g NaH2PO4 2.1g MgSO4 ·7H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 定容到1000ml 培养基二 1.从物理性质来讲，两者属于_____培养基，判断依据是_______________；该类培养基的主要用途为_______________。 2.从用途上来讲， 属于选择培养基，目的是为了获得 。 3.两种培养基共有的培养基成分有： 。 培养基一的主要碳源为 ， 主要氮源为 ； 培养基二的碳源为 ，氮源为 。 固体 添加了凝固剂琼脂 分离、鉴定、计数、保存 培养基二 能分解尿素的微生物 碳源、氮源、无机盐、水 牛肉膏 蛋白胨 葡萄糖 尿素 现 学 用 现 11 02 1g土壤中有多少能分解尿素的细菌？ 分离：获得分解尿素的细菌的纯培养物 计数：测定分解尿素的细菌的数量 概念：将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，进行培养。 主要过程: A、梯度稀释菌液 B、涂布平板 稀释度足够高时，能在培养基表面形成单个菌落。 微生物的选择培养 稀释涂布平板法 发酵工程 12 02 微生物的选择培养 1×10 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1×102 1×103 1×104 1×105 1×106 1×107 9 mL 无菌水 90mL无菌水 10