内容正文:
第2章 细胞工程
第2节 动物细胞工程
Part3 动物体细胞核移植技术和克隆动物
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发酵工程
目录 /CONTENTS
01
02
体细胞核移植技术
应用前景及存在的问题
2
植物组织培养!
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01
体细胞核移植技术
1.概念:
将动物一个细胞的细胞核,移入去核的卵母细胞中,使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术。
用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。
2.原理:
动物细胞核的全能性
为何不称为“克隆技术”而是“核移植技术”?
细胞工程
克隆是指由一个共同的祖先,通过无性繁殖产生一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。
拓展:
克隆
1.定义:
2.三个层次:
DNA(分子)、细胞、个体
思考:下列克隆分别用什么技术:
动物细胞克隆—— 动物克隆——
植物克隆—— DNA克隆——
动物细胞培养
核移植
植物组织培养
PCR技术
克隆就是无性繁殖
克隆(Clone)技术:是一很广的概念,凡指新形成的事、物与亲本一致的现象均可称为“克隆”。
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体细胞核移植技术
4.种类:
胚胎细胞核移植:
体细胞核移植:
细胞分化程度低,表现全能性容易
细胞分化程度高,表现全能性十分困难
3.生殖方式:
1.概念:
将动物一个细胞的细胞核,移入去核的卵母细胞中,使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术。
用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。
2.原理:
动物细胞核的全能性
无性生殖
难度小
难度大
细胞工程
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体细胞核移植技术
①供体细胞的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复其____前的功能状态,这导致了_____________;
胚胎发育率低
②对非人灵长类动物_____进行操作的技术尚不完善。
胚胎
分化
5.非人灵长类动物体细胞核移植的困难原因
具有许多与人类相似的生物学特征的灵长类动物
2017年我国培育世界上
首例体细胞克隆猴
细胞工程
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细胞工程
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体细胞核移植技术
将胚胎移入受体(代孕)母牛体内
6.过程
细胞工程
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体细胞核移植技术
【思考 讨论】
体积大、营养多、容易操作;
营养物质丰富,为发育提供充足营养
含有促使细胞核表达全能性的物质
高产奶牛(供体)
因为10代以内的细胞
保证了供体细胞正常的遗传基础。
为何选用MⅡ卵母细胞?
问
一般选用10代以内的细胞,为什么?
问
采集卵母细胞,体外培养至MⅡ期
细胞工程
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体细胞核移植技术
通过显微操作去核
梯度离心
紫外光短时间照射
化学物质处理
使DNA变性失活,达到去核的目的。
没有刺破卵母细胞膜,对卵母细胞伤害小。
纺锤体——染色体复合物
卵母细胞去核的原因是什么?方法是什么?
问
为使核移植动物的核遗传物质全部来自供体的细胞;
并防止细胞染色体的数量发生变化
方法:显微操作法
细胞工程
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体细胞核移植技术
将供体细胞注射入去核的卵母细胞
将供体细胞整个注入去核卵母细胞中的原因?
问
对卵母细胞损伤较小;
保证供体细胞的细胞核不被破坏, 操作方便。
细胞工程
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体细胞核移植技术
通过电融合法使两细胞融合,供体核进入卵母细胞,形成重构胚。
重构胚是指人工重新构建的胚胎,具有发育成完成个体的能力。
什么是重构胚?处理重构胚的目的是什么?
问
用物理或化学方法(电刺激、Ca2+载体、乙醇和蛋白酶合成抑制剂等)激活重构胚,使其完成细胞分裂和发育进程
将胚胎移入受体
(代孕)母牛体内
克隆犊牛
细胞工程
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体细胞核移植技术
重构胚
克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?
为什么?
问
克隆动物遗传物质
细胞核的DNA
来自于供体动物的细胞核
线粒体中的DNA
供体细胞和卵母细胞
生活环境:
性状
可能发生基因突变、染色体变异等可遗传变异
出生与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛
细胞工程
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体细胞核移植技术
早期胚胎培养
动物细胞培养
胚胎移植
动物细胞融合
重构胚
早期胚胎
通过电融合法使两细胞融合,供体核进入卵母细胞
用物理或化学方法激活重构胚,使其完成细胞分裂和发育过程
将胚胎移入受体(代孕)母牛体内
采集牛卵巢中的卵母细胞,在体外培养到MⅡ期
去核的卵母细胞
供体细胞培养
将供体细胞注入去核的卵母细胞
通过显微操作去核
高产奶牛(供体)
从供体身体的某一部位(如耳)上取体细胞
生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛
该过程中应用到了哪些技术?
动物细胞核移植
动物细胞培养
动物细胞融合
早期胚胎培养
胚胎移植
动物体细胞的细胞核具有全能性
问
该技术证明了什么?
问
细胞工程
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