2.2.2 动物细胞融合技术与单克隆抗体-【实践教学】2022-2023学年高二生物同步优质课件（人教版2019选择性必修3）

第2章 细胞工程 第2节 动物细胞工程 Part2 动物细胞融合技术与单克隆抗体 1 发酵工程 目录 /CONTENTS 01 02 动物细胞融合技术 微生物的纯培养 单克隆抗体及其应用 2 植物体细胞杂交 植物细胞融合 植物组织培养 温故而知新： 意义：打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种。　　　　　 温故而知新： 实验：人——鼠细胞荧光标记融合实验 5 01 动物细胞融合技术 使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 形成具有原来两个或多个细胞的遗传信息的杂交细胞 细胞膜具有一定的流动性 1、概念： 4、结果： 2、原理： 3、诱导方式 物理法：电融合法 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活病毒诱导法 与植物原生质体融合的方法相同 ——动物细胞融合特有 细胞工程 6 01 动物细胞融合技术 5、过程: 动物细胞融合 动物细胞培养 细胞膜的流动性 细胞增殖 细胞工程 7 01 动物细胞融合技术 灭活病毒诱导细胞融合的原理 灭活：指用物理或化学手段使病毒失去感染能力（不感染细胞）， 但是并不破坏病毒的抗原结构（诱导细胞融合）。 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 【拓展】 细胞工程 8 01 动物细胞融合技术 正在融合的淋巴细胞与骨髓瘤细胞 7、应用： 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。 6、意义： 至今，种间、属间、科间，甚至动物和植物之间的细胞融合都已获得成功。 研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。 为制造单克隆抗体开辟了新途径。 细胞工程 项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 步骤 诱导方法 结果 意义 比较动物细胞融合与植物体细胞杂交 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 酶解法去掉细胞壁后，诱导原生质体融合， 形成杂种体细胞， 再经过植物组织培养形成杂种植株 分散成单个细胞后诱导细胞融合 物理方法、化学方法 物理方法、化学方法、灭活病毒 形成杂种植株 形成杂种细胞 克服远缘杂交不亲和障碍 10 11 02 单克隆抗体及其应用 1.定义：机体受抗原刺激后产生的，能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 2.抗体的分布： 1）血清（主要） 2）组织液及外分泌液（如乳汁中） 体液免疫 抗体 1）每个B淋巴细胞只分泌一种特异性的抗体 2）体内产生的特异性抗体种类多达百万种以上 抗体 细胞工程 12 02 单克隆抗体及其应用 1抗原 传统抗血清 （所有抗体混合） 免疫 1 1 2 3 4 缺陷：产量低、纯度低，特异性差。 （不能无限增殖） 动物体内 1抗原 注射 浆细胞 1抗体 1B淋巴细胞 增殖分化 1、传统抗体制备方法及缺陷 1 细胞工程 13 02 单克隆抗体及其应用 动物细胞融合 杂交细胞 动物细胞培养 单克隆抗体 骨髓瘤细胞 （能无限增殖） 一种B淋巴细胞 （只分泌一种特异性抗体） 杂交瘤细胞 既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体 一个极富创造力的方案 1975年，米尔斯坦和柯勒 1984年，诺贝尔生理学或医学奖 细胞工程 14 02 单克隆抗体及其应用 动物细胞融合 杂交细胞 动物细胞培养 单克隆抗体 骨髓瘤细胞 （能无限增殖） 一种B淋巴细胞 （只分泌一种特异性抗体） 杂交瘤细胞 既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体 单 克 隆 抗 体 一个B淋巴细胞 细胞群 抗体 克隆 一个极富创造力的方案 细胞工程 15 02 单克隆抗体及其应用 注射特定抗原 从患骨髓瘤的小鼠体内取骨髓瘤细胞的培养 多种已免疫B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 诱导融合 小鼠的脾脏中获取 2、单克隆抗体的制备过程 细胞工程 16 02 单克隆抗体及其应用 2 杂交瘤细胞(多种) 1 3 置于选择性培养基上培养 第一次筛选 融合的细胞 BB 1 3 2 B B瘤 瘤瘤 瘤 √ 细胞工程 17 02 单克隆抗体及其应用 克隆化培养 抗体检测 第二次筛选 (抗原-抗体杂交技术) 能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 阳性细胞 杂交瘤细胞(多种) 细胞工程 18 02 单克隆抗体及其应用 体外培养 单克隆抗体 体内或体外培养 能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 注射到小鼠腹腔 细胞工程 19 【培养杂交瘤细胞的方法比较】 项目 腹腔培养 体外培养 优点 缺点 易于控制培养条件（如无需提供无菌环境等），操作简单，成本较低 规模小，产量少 可大规模培养，大量生产 需要人为控制培养条件，成本相