2.2.1 动物细胞培养-【实践教学】2022-2023学年高二生物同步优质课件（人教版2019选择性必修3）

第2章 细胞工程 第2节 动物细胞工程 Part1 动物细胞培养 1 2 1、动物细胞培养（基础） 2、动物细胞融合与单克隆抗体 3、动物细胞核移植技术与克隆动物 动物细胞工程 的基本技术 发酵工程 目录 /CONTENTS 01 02 动物细胞培养的条件 微生物的纯培养 03 干细胞培养及其应用 动物细胞培养的过程 3 皮肤的自体移植 灰绿色 小面积烧伤：植皮(自身)后恢复 1）使用他人皮肤？ 患者自身的不够用，如何解决？ 大面积烧伤？ 2）培养自身细胞？ 从社会中来 人造皮肤：人体再生术的秘密 1、概念： 从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 2、目的： 获得细胞或细胞产物；不能获得完整动物个体。 3、原理： 细胞增殖（有丝分裂） 那么，动物细胞的培养需要哪些条件呢？ 动物细胞培养 动物体 组织 单个细胞 细胞生长和增殖 取出 分散 适宜条件 6 7 01 动物细胞培养的条件 糖类、氨基酸、无机盐、维生素 … 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 充足的营养、稳定的内环境 将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基 含人类未知、细胞生长增殖所必需的物质，满足细胞对未知营养成分的需求。 培养基的构成：合成培养基 + 血清等天然成分 一般用液体培养基， 也称为培养液 细胞工程 8 01 动物细胞培养的条件 糖类、氨基酸、无机盐、维生素 … 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 ①培养液、培养用具：灭菌处理； ②无菌操作； ③适量添加抗生素 定期更换培养液，以便清除代谢物。 ①适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以___________ 为宜； ②适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为________ ； ③适宜的渗透压： 维持细胞正常的形态和功能。 36.5±0.5℃ 7.2-7.4 细胞工程 9 01 动物细胞培养的条件 糖类、氨基酸、无机盐、维生素 … 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 维持培养液的pH 95%空气 + 5%CO2 的CO2 培养箱 O2：细胞代谢所必需 CO2培养箱 松盖培养瓶 培养皿 细胞工程 10 02 动物细胞培养的过程 1）选幼龄动物（或胚胎）的组织器官 这些个体的细胞分化程度低、分裂能力强，易培养。 3）分散细胞时为何不选用胃蛋白酶？ 2）培养前为什么分散成单个细胞？ ①分散不会限制彼此的生长与增殖； ②分散有利于与培养液充分接触，保证O2与营养供应和代谢物及时排出。 多数动物细胞生存的适宜pH为7.2～7.4，而胃蛋白酶的适宜pH约为2，在此环境中会失活。 细胞工程 11 02 动物细胞培养的过程 体外培养的动物细胞 要求：（培养瓶（皿）内表面光滑、无毒、易于贴附） 悬液中分散的细胞贴附在瓶壁生长的现象； 细胞贴壁 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖的现象 接触抑制 细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等 接触抑制 悬浮生长 贴壁生长 (大多数） 细胞工程 12 02 动物细胞培养的过程 ①原代培养：指动物组织经处理后的初次培养,分瓶前的细胞培养。 ②传代培养：分瓶后的细胞培养。 悬浮细胞 贴壁细胞 ②制成细胞悬液，分瓶培养 ①收集细胞 加培养液 离心法 胰蛋白酶， 离心法 细胞工程 思考●讨论2：植物组织培养和动物细胞培养的比较 P42 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 培养基 培养基特有成分 过程 结果 相同点 固体培养基 葡萄糖、动物血清 液体培养基 细胞增殖 植物细胞的全能性 许多细胞 蔗糖、植物激素 ①都进行有丝分裂，不涉及减数分裂； ②均需无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件 新的植株 外植体 ↓脱分化 愈伤组织 　 ↓再分化 芽、根或胚状体 ↓生长发育 植物体 动物的组织 　　　　　 ↓ 机械法或胰蛋白酶、 ↓ 胶原蛋白酶处理 细胞悬液 ↓ 原代培养 ↓ 细胞悬液 ↓ 传代培养 14 03 干细胞培养及其应用 1.干细胞的概念： 2.干细胞的来源： 3.干细胞的类型： 动物和人体内保留的具有分裂和分化能力的细胞。 在一定的条件下，干细胞可以分化成其他类型的细胞。 早期胚胎、骨髓和脐带血 等多种组织和器官中。 细胞工程 15 03 早期胚胎中 具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。 胚胎干细胞 分布 特点 应用实例 在体外分化