1.2 微生物的培养技术及应用（第3课时）（上课用课件）-2022-2023学年高二生物同步精品课堂（人教版2019选择性必修3）

1.2 微生物的培养技术及应用（第3课时） 教学目标 1.概述培养基的营养构成和种类 2.概述无菌技术的原理和方法，掌握无菌操作 3.通过配制培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基，初步掌握配制培养基的基本技能 4.概述分离和纯化微生物的平板划线法和稀释涂布平板法 5.概述测定微生物数量的稀释涂布平板法和显微镜计数法 二 微生物的选择培养和计数 二 微生物的选择培养和计数 1973年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌，进而从这种菌中提取出耐高温的DNA聚合酶。这种酶目前已被广泛用于体外扩增DNA片段的聚合酶链式反应(PCR)。 实验室中微生物的筛选，也可以应用同样的原理，即人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和pH等) ，同时抑制或阻止其他微生物的生长。 1.为什么水生栖热菌能从热泉中被筛选出来呢？ 这是因为水生栖热菌能在 70~80 ℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 2.如何从众多的微生物中筛选出单一菌种？ 那什么是选择培养基呢？ 1.选择培养基 选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 原理：人为提供有利于目的菌生长的条件（包括营养、温度和PH等），同时抑制或阻止其他微生物的生长。 耐热微生物 耐寒微生物 石油分解菌 二 微生物的选择培养和计数 分离酵母菌、霉菌等真菌 分离固氮菌 分离自养型微生物 ④加高浓度食盐 金黄色葡萄球菌 ⑤金黄色葡萄球菌 能消除石油污染的微生物 ③不加含碳有机物的无碳培养基 ②不加氮源的无氮培养基 ①加入青霉素的培养基 常见的选择培养基 1.选择培养基 二 微生物的选择培养和计数 选择培养基配方的设计 尿素[CO(NH2)2]含氮量高，化学性质相对稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH3，NH3再转化为NO-、NH4＋等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可作为细菌生长的氮源。 CO(NH2) 脲酶 + H2O + CO2 2NH3 NO-、NH4＋ 被植物吸收 尿素分子模型 1.选择培养基 二 微生物的选择培养和计数 1. 如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 2. 该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？ 思考·讨论 设计一种选择培养基，用尿素作为唯一氮源,可以将分解尿素的细菌分离出来。 这种培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分基本相同。 尿素分子模型 1.选择培养基 二 微生物的选择培养和计数 选择培养基配方的设计 培养基② 培养基① 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g 蒸馏水 定容到1000ml KH2PO4 1.4g NaH2PO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素CO(NH2)2 1.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 定容到1000ml 2.从用途上来讲，哪个属于选择培养基？将得到何种细菌？ 都属于固体培养基。依据是添加了凝固剂琼脂，且比例为1.5%-2%。 培养基的主要用途是分离、鉴定、计数。 1.从物理性质看两种培养基属于哪类？依据是什么？ 3.两种培养基中共有哪些成分？哪些作为碳源、氮源？ 培养基二属于选择培养基；其可获得能分解尿素的微生物。 碳源、氮源、无机盐、水； 培养基①的碳源为牛肉膏，氮源为蛋白胨；培养基②的碳源为葡萄糖，氮源为尿素； 二 微生物的选择培养和计数 1g土壤中有多少能分解尿素的细菌? 原理：通过对土样进行充分稀释，再将菌液涂布到制备好的培养基上，即可得到能分解尿素的细菌的纯培养物。 稀释涂布平板法 梯度稀释和涂布平板 平板划线法 （上节已讲） 仅有选择培养基可以了吗？ 2.微生物的选择培养 二 微生物的选择培养和计数 二 微生物的选择培养和计数 将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。 1×10 1 mL 1 mL 1×107 1×106 1×105 1×104 1×103 1×102 9 mL 无菌水 90mL无菌水 10g ②在火焰旁将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀，制成菌液。 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL ①铲取土样，将样品装入纸袋中。 2.微生物的选择培养 二 微生物的选择培养和计数 稀释涂布平板法的操作过程 微量移液枪 ③取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。 ④将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。 ⑤将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷