内容正文:
15.A解析:目标基因插入需使用限制酶和DNA连接
18.答案:(16分,除标注外每空2分)(1)部分合成HA蛋
酶,前者有序列识别特异性,后者无特异性,A错误;只
白的RNA控制合成的蛋白质具有抗原特性,又不会
有插入到T2噬菌体外壳蛋白基因的合适位置,方能
使动物致病(3分)逆转录酶、限制酶和DNA连接酶
展示到T2噬菌体表面,B正确;诱变过程中基因突变
(2)磷酸二酯键(3)目的基因(HA基因)解旋为单
是不定向性的,可使T2噬菌体所展示的蛋白更加多
链、引物与单链相应互补序列结合、在Tag DNA聚合
样化,C正确;T2噬菌体的宿主细胞是大肠杆菌,应培
酶作用下延伸,如此重复循环3'(4)敲除或插入特
养大肠杆菌后让T2噬菌体侵染大肠杆菌以培养
异性抗原蛋白基因(3分)(5)生物界共用一套遗传
T2噬菌体,D正确。
密码
16.答案:(14分,除标注外每空2分)(1)PCR(1分)终
解析:(I)由于部分合成HA蛋白的RNA控制合成的
止子、标记基因使目的基因在乳腺组织细胞中特异
蛋白质具有抗原特性,又不会使动物致病,所以从猪流
表达(2)显微注射(1分)受精卵囊胚滋养层
感病毒中提取部分合成HA蛋白的RNA,而不是用猪
细胞(3)周期短、不受性别和年龄的限制
流感病毒的全部RNA。图中①②是构建重组质粒,
解析:(I)对目的基因进行扩增的方法是PCR技术;基
③是通过逆转录得到HA基因,所以用到的工具酶有
因表达载体的组成部分除目的基因外,还包括启动子、
逆转录酶、限制酶和DNA连接酶。(2)核酶可以水解
终止子、标记基因等;启动子是RNA聚合酶识别和结
RNA,作用的化学键为磷酸二酯键。(3)PCR技术扩
合的位点,用于驱动基因的转录,为使目的基因在乳腺
增过程包括:目的基因(HA基因)解旋为单链、引物与
组织细胞中特异表达,构建乳腺生物反应器时选用的
单链相应互补序列结合、在TagDNA聚合酶作用下延
是乳腺蛋白基因的启动子。(2)将目的基因导入动物
伸,如此重复循环。引物应结合在模板链的3'。(4)为
细胞的方法是显微注射法;由于受精卵的全能性最高,
了获得无毒性、多功能复合疫苗,需要对伪狂犬病病毒
故将目的基因导入到奶牛的受精卵中;做性别鉴定时
毒力有关的基因进行敲除或插入特异性抗原蛋白基因
需要取发育至囊胚期的滋养层细胞。(3)与乳腺生物
从而重组出既无毒蛋白又具有各种应用途径的表达载
反应器相比,膀胱反应器的优势表现在周期短、不受性
体。(5)猪流感病毒的HA基因和发光水母中获取的
别和年龄的限制。
绿色荧光蛋白基因都能够在鸡胚成纤维细胞中分泌表
17.答案:(10分,除标注外每空1分)(1)目的基因
达出相应的蛋白质,其原因是各种生物共用一套遗传
T-DNA(2)DNA半保留复制(2分)耐高温的
密码。
-G
GATCC-
第4节蛋白质工程的原理和应用
DNA聚合酶(3)
(2分)
-CCTAG
G
1.D解析:蛋白质工程需对编码蛋白质的基因进行有目
没有抗原一抗体杂交(2分)
的的设计和改造,需构建基因表达载体,A正确;蛋白质
解析:(I)由题可知,Bt基因为目的基因;若将Bt基因
工程通过改造或合成基因,来改造现有蛋白质,或制造
插入到Ti质粒的T-DNA上,通过农杆菌的转化作用,
一种新的蛋白质,改造后的蛋白质不再是天然的蛋白
就可以使其导入玉米细胞并将其插入到玉米细胞中的
质,B正确;蛋白质工程需对编码蛋白质的基因进行有
染色体DNA上。(2)PCR利用DNA半保留复制的原
目的的设计和改造,需要限制性内切核酸酶和DNA连
理,在已知一段目的基因的核苷酸序列的前提下,利用
接酶,C正确;蛋白质工程是改造或合成基因,来改造现
PCR技术扩增Bt基因时,需要提供模板、原料、引物、
有蛋白质,或制造一种新的蛋白质,是在基因水平上改
耐高温的DNA聚合酶等条件,将模板DNA加热超过
造蛋白质的,D错误。
90℃的目的是使Bt基因(受热后)解开为单链。
2.A解析:蛋白质工程是通过改造或合成基因,来改造
(3)根据碱基互补配对原则,目的基因被限制酶切割后
现有蛋白质,或制造一种新的蛋白质,因而蛋白质工程
一G
GATCC-
流程的顺序应为E→F→G→A→B→C→D,A错误;多
所形成的黏性末端为
CCTAG
G-。DNA连
数蛋白质除具有一级结构(即氨基酸顺序)外,还具有复
接酶对所连接的两端碱基序列没有专一性要求。
杂的高级结构,即空间结构,而很多蛋白质的空间结构
Bt基因的“表达”产物是一种毒蛋白,可以采用抗原一
是人们目前还不清楚的,因此目前蛋白质工程最大的困
抗体杂交的方法进行检测。
难是E过程,即设计预期的蛋白质结构,B正确:蛋白质
29
工程最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成,8.Cⅳ