内容正文:
首例胚胎移植成功 首创动物组织体外培养法 发现哺乳动物精子获能现象 体细胞核移植成功 试管家兔诞生 创立单克隆抗体技术 胚胎分割移植成功 分离和培养小鼠胚胎干细胞 克隆羊多莉诞生 获得诱导多能干细胞 单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿诞生 我国科学家首次培育了体细胞克隆猴 1959年 1890年 1907年 1951年 1958年 1975年 1978年 1981年 1996年 2006年 2014年 2017年 动物细胞工程的发展历程 科技探索之路 湖南长郡卫星远程学校 录制 2022年上学期 制作 05 长沙市长郡中学 俞奕 克隆猴:中中和华华 克隆皮肤 单克隆抗体 第2节 动物细胞工程 动物细胞工程常用的技术有哪些? 动物细胞培养、动物细胞融合、动物细胞核移植。 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 湖南长郡卫星远程学校 录制 2022年上学期 制作 05 长沙市长郡中学 俞奕 人造皮肤:人体再生术的秘密 湖南长郡卫星远程学校 录制 2022年上学期 制作 05 长沙市长郡中学 俞奕 植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术。 知识回顾:什么是植物组织培养? 湖南长郡卫星远程学校 录制 2022年上学期 制作 05 长沙市长郡中学 俞奕 就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖的技术 一、动物细胞培养 1.概念: 动物体 组织 单个细胞 细胞生长和增殖 取出 分散 适宜条件 2.原理: 3.地位: 动物细胞工程的基础 细胞增殖 湖南长郡卫星远程学校 录制 2022年上学期 制作 05 长沙市长郡中学 俞奕 < > 动物细胞培养 所需基本条件 其他 条件 营养条件 糖类、氨基酸 无机盐、维生素 … … 无菌、无毒的环境 适宜温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 二、动物细胞培养条件 湖南长郡卫星远程学校 录制 2022年上学期 制作 05 长沙市长郡中学 俞奕 (1)营养条件: ①合成培养基: 将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基称为合成培养基。 ②血清、血浆等一些天然成分: 由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚 ③培养基类型: 一般使用液体培养基,也称为培养液 为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清? 血清中含有多种维持细胞代谢和生长的物质, 如蛋白质、氨基酸、未知的促细胞生长因子等。 (2)无菌、无毒的环境: ①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理 ②在无菌环境下进行操作 可根据实际情况适量添加抗生素,防止培养过程中微生物的污染。 ③培养液需要定期更换: 以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。 注意说明 (3)温度、pH和渗透压: ①适宜的温度: 哺乳动物细胞培养的温度多以_为宜; 36.5±0.5℃ ②适宜的pH: 多数动物细胞生存的适宜pH为_ 7.2-7.4 ③适宜的渗透压: 维持细胞正常的形态和功能 (4)气体环境: ①气体的组成及作用: O2: CO2: 细胞代谢所必需 维持培养液的pH ②容器: 通常采用培养皿或松盖培养瓶。 ③仪器:置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。 传代培养 取动物组织 制成细胞悬液 原代培养 放入CO2培养箱中培养 放入CO2培养箱中培养 用机械的方法,或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法,将组织分散成单个细胞 三、动物细胞培养过程 湖南长郡卫星远程学校 录制 2022年上学期 制作 05 长沙市长郡中学 俞奕 取动物组织 用机械的方法,或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理 单个细胞 加培养液 细胞悬液 原代培养(10代以内) 在培养皿或培养瓶中 传代培养(10代-50代) 细胞分化程度低,分裂能力强,容易培养 (1)选材原因: (2)培养前为什么分散成单个细胞? 分散成单个细胞扩大了细胞与培养液的接触面积,利于细胞吸收营养和排出代谢废物。 (3)胰蛋白酶的作用?胃蛋白酶可以吗?理由。 将动物组织细胞间的蛋白质成分酶解,使细胞分散开,获得单个细胞 不可以 (4)在用胰蛋白酶处理组织时应注意什么? 细胞膜含有蛋白质,长时间处理会损伤细胞,要控制好时间。 分瓶 (幼龄动物的组织器官) 胃蛋白酶作用的适宜pH约为1.5,当pH大于6时,胃蛋白酶就会失去活性,多数动物细胞培养的适宜pH为7.2-7.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性, 湖南长郡卫星远程学校 录制 2022年上学期 制作 05 长沙市长郡中学 俞奕 (5)体外培养的动物生长类型 ①悬浮生长类: 能够悬浮在培养液中生长增殖。 会因细胞密度过大、有害代谢物积累和 培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。 ②贴壁生长类: 大多