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伊川县第一高中2022—2023学年高二下学期生物竞赛实验技术专题卷1
1.双抗体夹心法酶联免疫吸附实验是定量检测抗原的常用方法,实验中使用的两种抗体分别是能固定于反应体系中的固相抗体和与酶偶联的酶联抗体,检测方法如下图所示。下列说法错误的是( )
A.固相抗体和酶联抗体均能识别待测抗原,说明两者结构相同
B.固相抗体和酶联抗体可由同一抗原利用单克隆抗体技术制备
C.反应体系的颜色越深说明样品中待测抗原含量越高
D.需设置分别添加酶联抗体和固相抗体后加入无色物质的两个对照实验
2.细胞周期受到一系列功能蛋白的调控。如p53蛋白是一种由抑癌基因控制的蛋白质,可以判断DNA损伤的程度。若损伤小,该蛋白能促使DNA自我修复;若DNA损伤大,则诱导细胞凋亡。蛋白激酶CDK2被周期蛋白CyclinE激活后促进细胞由G1期进入S期;蛋白激酶CDK1被周期蛋白Cyclin B激活后促进细胞由G2期进入M期。下列有关叙述正确的是( )
A.抑制p53蛋白基因的表达,则细胞不能分裂
B.p53蛋白可使DNA受损的细胞分裂间期缩短
C.抑制Cyclin B基因的表达可使细胞周期停滞在G2/M交界处
D.Cyclin E可能与细胞内染色质螺旋化和纺锤体的形成密切相关
3.真核细胞的细胞周期受多种物质的调节,其中CDK2-cyclinE能促进细胞从G1期(DNA合成前期)进入S期(DNA合成期)。如果细胞中的DNA受损,会发生下图所示的调节过程,图中数字表示过程,字母表示物质。下列叙述错误的是( )
A.DNA损伤时活化的p53蛋白调控过程①的进行,RNA聚合酶与p21基因结合
B.过程②中可发生多个核糖体结合在物质A上,提高p21蛋白分子的表达量
C.正常情况下p53蛋白通过抑制p21基因的表达,从而使细胞周期正常运转
D.失活的CDK2-cyclinE,将导致细胞周期中分裂期的细胞比例显著下降
二、多选题
4.酶联免疫吸附试验(ELISA)是常用的测定抗体的技术,其基本原理如下图所示。相关叙述正确的是( )
A.待测抗体既可以和抗原结合又可以和酶标二抗结合
B.酶标二抗和抗原由于结构相同均能与待测抗体发生结合
C.酶标抗体有免疫学活性和酶活性可催化待测抗体的水解
D.可通过测定单位时间内有色产物的生成量来推测待测抗体的含量
三、综合题
5.人类免疫缺陷病毒(HIV) 由核衣壳和包膜两部分组成,核衣壳包括衣壳蛋白、两条单链RNA、逆转录酶等。下图表示艾滋病毒(HIV)入侵人体细胞及其繁殖过程的示意图,请回答∶
(1)过程③和过程⑥需要的酶分别是________、___________。
(2)过程⑦的场所在_____________, 原料是___________。
(3)潜伏期的感染者可以没有任何临床症状,但不是静止期,更不是安全期。此时期潜伏感染的细胞表面没有HIV蛋白,其意义是_____________。
(4)下图表示利用免疫印迹技术检测HIV抗体的示意图,首先是利用电泳技术将分子量大小不同的蛋白质分开∶将电泳分离的病毒蛋白质转印到纤维膜上,将纤维膜浸于待检血清中,洗去未结合的抗体,加酶标二抗,最后加酶所催化的底物显色。
①HIV可以引起机体产生多种抗体的原因是_________。
②酶标二抗中酶的作用是_______.
③待检个体A、B、C三人的HIV的核酸检测均为阳性,通过抗体检测可判断感染时期,检测结果如图,泳道1是艾滋病毒多种特异抗体的对照,泳道2是正常人,以正常人做对照的目的是____。 请对 A的诊断结果做出分析____________。
(5)理论上讲疫苗接种是控制病毒性传染病最经济、最有效的措施,但是至今没有得到效果较好的抗HIV疫苗,其原因可能有 。
A.HIV遗传物质为单链RNA,具有高度的变异性
B.HIV的逆转录酶核苷酸的纠错功能较低
C.科学家对HIV的致病机理了解得还不充分
D.科学家还未测出HIV的核苷酸序列
6.被我国列入“中国环境优先污染物黑名单”的小分子化合物“1—芘丁酸”(PBA)具有很强的致癌性。主要存在于空气、水和土壤中。研究人员针对PBA制备单克隆抗体对其进行免疫学检测。
(1)PBA结构简单,一般要与特定蛋白BSA偶联成大分子人工抗原(PBA-BSA)才能引起免疫反应。科研人员取12只生长状况相同的健康小鼠均分成甲、乙、丙3组,分别用PBA-BSA、PBA、BSA间隔多次免疫。图1为ELISA酶联免疫吸附法检测免疫小鼠血清抗体相对浓度的原理示意图。
①检测过程中需将PBA作为________固定在固相载体上,依次将________加入反应体系。实验过程中“充分洗涤”最主要的目的是________。
②检测结果若为甲组显色较深,乙组、丙组