内容正文:
第1章 发酵工程
第2节 微生物的培养技术及应用
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第2课时 微生物的选择培养和计数
学习目标
1. 通过实例,理解各类微生物都能适应其生活环境。(生命观念)
2.根据微生物的代谢类型,配制选择培养基,总结分离微生物的过程和测定微生物数量的常用方法。(科学思维)
3.通过对土壤中分解尿素的细菌进行分离和计数,理解并掌握微生物计数的方法。(科学探究)
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自主预习·悟新知
合作探究·提素养
深化拓展·育技能
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一、选择培养基
1.概念:在微生物学中,允许特定种类的微生物生长,同时①____________其他种类微生物生长的培养基。
2.实验室中微生物的筛选原理:人为提供②________________________(包括营养、温度和 <m></m> 等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。
3.配制思路:以某种物质为唯一碳源或氮源;加某种抗生素;减少某种必需营养。
抑制或阻止
有利于目的菌生长的条件
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二、微生物的选择培养
1.方法:对土样进行充分稀释,然后将③______涂布到制备好的④______培养基上。
2.稀释涂布平板法的操作过程
(1)系列梯度稀释操作:
菌液
选择
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(2)涂布平板操作:
Ⅰ.取菌液:取⑤_______菌液,滴加到⑥____________。
Ⅱ.涂布器灭菌:取出浸在⑦______中的涂布器,放在⑧______上灼烧,待酒精燃尽后,
⑨______涂布器。
Ⅲ.涂布:用涂布器将菌液⑩______地涂布在培养基表面,涂布时可⑪______培养皿,使涂布⑫______。
3.培养:待涂布的菌液被培养基吸收后,将平板⑬______,放入⑭____________中培养,观察。
<m></m>
培养基表面
酒精
火焰
冷却
均匀
转动
均匀
倒置
恒温培养箱
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三、微生物的数量测定
1.稀释涂布平板法
(1)原理:当样品的⑮________足够高时,培养基表面生长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个⑯______。通过统计平板上的⑰________,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
(2)计数原则:平板上菌落数应为⑱_________,在同一稀释度下,应至少对⑲___个平板进行重复计数,然后求出⑳________。
(3)不足:当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是㉑____个菌落,所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目㉒____。
稀释度
活菌
菌落数
30~300
3
平均值
一
少
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2.显微镜直接计数法
(1)计数工具:显微镜、细菌计数板或血细胞计数板。
(2)不足:由于计数结果是活菌数和死菌数的总和,因此一般比活菌的实际数目㉓______。
偏多
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四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
1.原理:绝大多数微生物都能利用葡萄糖,但是只有能合成㉔______的微生物才能分解尿素。利用以㉕______作为唯一氮源的选择培养基,可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。
2.实验设计
(1)土壤取样:铲去表层土,在距地表㉖______ <m></m> 的土壤层取样。
(2)样品的稀释:测定土壤中细菌的数量,一般选用㉗___________________________倍稀释的稀释液进行平板培养。
(3)微生物的培养与观察:细菌一般在㉘________ <m></m> 的温度下培养㉙______ <m></m> 。每隔
㉚____ <m></m> 统计一次菌落数目,选取菌落数目㉛______时的记录作为结果。
脲酶
尿素
3~8
<m></m> 、 <m></m> 和 <m></m>
30~37
1~2
<m></m>
稳定
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任务 对分解尿素的微生物进行分离和计数
活动1 配制选择培养基
下表是本任务使用的培养基的配方,根据配方配制培养基,分析并回答以下问题:
组分 含量
<m></m> <m></m>
<m></m> <m></m>
<m></m> <m></m>
葡萄糖 <m></m>
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组分 含量
尿素 <m></m>
琼脂 <m></m>
<m></m> 定容至 <m></m>
1.从物理性质上看,此培养基属于哪种类型的培养基?如何判断的?
提示 此培养基从物理性质上看属于固体培养基,因为加入了凝固剂(琼脂)。
2.从功能上看,此培养基属于哪种类型的培养基?此培养基是如何实现其功能的?
提示 此培养基从功能上看属于选择培养基。此培养基的氮源只有尿素,只