(教用word)第1章 第2节 第2课时 微生物的选择培养和计数-【提分教练】2022-2023学年新教材高中生物选择性必修3 生物技术与工程(人教版2019)

第2课时　微生物的选择培养和计数 学习任务目标 1．运用适应观，举例说明选择性培养基的原理。 2．采用归纳与概括、模型与建模等方法，概述测定微生物数量的常用方法。 3．尝试运用稀释涂布平板法，对细菌进行分离和计数。 一、选择培养基 1．概念 (1)生长：特定种类的微生物。 (2)抑制或阻止：其他种类的微生物。 2．实例 下列培养基属于选择培养基的①④⑤。 ①80 ℃条件下的培养基 ②pH＝7条件下的培养基 ③牛肉膏蛋白胨培养基 ④以尿素为唯一氮源的培养基 ⑤添加青霉素的培养基 二、微生物的选择培养 1．培养基：选择培养基。 2．样品处理：对样品进行充分稀释。 3．接种方法：稀释涂布平板法。 4．操作过程 (1)对涂布器进行消毒灭菌的字母是B、D。 (2)E步骤中向培养基加入菌液的体积是0.1 mL。 (3)A步骤中试管中加入1 mL菌液和9 mL无菌水，一次稀释10倍。 (4)正确的操作步骤字母顺序是CAEBDF。 (5)接种完毕后，将平板倒置，放入30～37 ℃的恒温培养箱中培养。 三、微生物的数量测定 1．稀释涂布平板法 (1)原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落相当于样品稀释液中的一个活菌。 (2)计数原则 ①一般选择菌落数为30～300的平板计数。 ②在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。 (3)不足：当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。 2．显微镜直接计数法 (1)计数工具：显微镜、细菌计数板或血细胞计数板。 (2)不足：由于计数结果是活菌数和死菌数的总和，所以一般比活菌的实际数目多。 四、探究·实践——土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1．原理：绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作为唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。 2．步骤 土壤取样：铲去表层土，距地表3～8 cm。注意取土样的铁铲和纸袋在使用前需要灭菌 　↓ 样品稀释：测定土壤中细菌的数量，一般选用1×104、1×105、1×106倍稀释的稀释液进行平板培养 　↓ 取样涂布：涂布器从酒精中取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然后再放在火焰上灼烧。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀 　↓ 培养：30～37 ℃培养1～2 d，同时培养空白培养基，分析培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落 　↓ 观察、记录并计数：每隔24 h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果并记录菌落的特征 3．操作提示 基于对土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验操作的理解，下列关于实验操作的说法正确的是①②⑤。 ①本实验耗时长，应提前制订好计划，提高效率。 ②本实验用到的器材比较多，应该对试管和平板做好标记。 ③取土样的铁铲和取样纸袋使用前都要经过消毒。 ④为了防止杂菌污染，从酒精中取出的涂布器应该直接在酒精灯火焰上充分燃烧灭菌。 ⑤过热的涂布器不能直接放在盛有酒精的烧杯中。 选择培养基 自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其是当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，更难实现。那么我们又如何达成这一目标呢？ 探究1．如何从大豆田土壤中分离出固氮微生物？ 提示：从大豆田土壤中取土样，利用缺乏氮源的培养基可分离出固氮微生物。 探究2．要分离出分解纤维素的微生物，应在什么样的环境中取土样？应配制什么样的培养基？ 提示：应从富含纤维素的环境中取土样，如树林中多年落叶形成的腐殖土。应配制以纤维素为唯一碳源的培养基。 探究3．根据选择培养基的原理，如何筛选出耐酸菌？ 提示：可将培养基的pH调至酸性，再接种培养。 原油中含有大量有害的、致癌的多环芳烃。土壤中有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈。为筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污，某小组同学设计了相关实验。下列有关实验的叙述，不正确的是(　　) A．应配制来源于被原油污染土壤的土壤稀释液备用 B．配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基 C．将土壤稀释液灭菌后接种到选择培养基上 D．在选择培养基上能形成分解圈的即为所需菌种 C　解析：为了筛选、获取能利用多环芳烃为碳源的菌种，首先是取材，应配制来源于被原油污染土壤的土壤稀释液备用，A正确；其次配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基，B正确；然后进行接种，在无菌环境下，将土壤稀释液接种到选择培养基上，在适宜的条件下进行培养，若将土壤稀释液进行灭菌，就不能筛选出能高效降解原油的菌株，C错误；在选择培养基上形成的菌落，若该菌落周围有分解圈，即为所需菌种，D正确。 【思维升华】选择培养基的选择作用 选择培养原理 具体处理 分离菌种 利用营养缺陷