内容正文:
第2节 微生物的培养技术及应用
第1课时 微生物的基本培养技术
学习任务目标
1.运用适应观,说明培养基的营养构成。
2.采用归纳与概括的方法,说明常用无菌技术的异同。
3.尝试利用给定的实验方案进行微生物的纯培养。
一、培养基的配制
1.培养基
(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)作用:用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
(3)种类
培养基种类
划分标准
特点
用途
液体培养基
物理性质
不含凝固剂
工业生产
固体培养基
加凝固剂,如琼脂
微生物分离、鉴定等
2.培养基的配制
(1)主要营养物质(连线)
(2)其他条件
微生物
特殊条件
乳酸杆菌
添加维生素
霉菌
pH为酸性
细菌
pH为中性或弱碱性
厌氧微生物
无氧的条件
二、无菌技术
1.目的:防止实验室的培养物被杂菌污染(获得纯净培养物);有效避免操作者自身被微生物感染。
2.关键:防止杂菌污染。
3.常见方法(连线)
三、微生物的纯培养
1.概念:由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。获得纯培养物的过程就是纯培养。
2.方法:平板划线法和稀释涂布平板法。
3.过程
(1)制备培养基
配制培养基:去皮的马铃薯200 g切成小块,加水1 000 mL,加热煮沸至马铃薯软烂,用纱布过滤。向滤液中加20 g葡萄糖或蔗糖、15~20 g琼脂,蒸馏水定容至1 000 mL
↓
灭菌
↓
倒平板:培养基冷却至50 ℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板,具体步骤如下:
(2)接种和分离酵母菌
①分离和培养酵母菌使用的方法是平板划线法。
②图中操作目的是灭菌的字母有b、e。
③该过程正确的顺序是baefcgd。
(3)培养酵母菌:将接种后的平板和一个未接种的平板倒置,放入28 ℃左右的恒温培养箱中培养24~48 h。
培养基的配制
人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质——培养基。用以培养分离保存微生物或积累其代谢产物。据此探究下列问题:
探究1.按照培养基的物理性质,培养基可划分为哪几种类型?
提示:培养基可依据物理性质划分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基。
探究2.若用于微生物的大量繁殖,应选择哪一种物理状态的培养基?为什么?
提示:液体培养基。菌体可以与营养液充分接触,有利于菌体充分利用营养物质。
探究3.牛肉膏含有糖、维生素等营养物质,蛋白胨含有有机氮、维生素等营养物质,所以一般将牛肉膏作为碳源,蛋白胨作为氮源。
已知某种细菌以CO2为唯一碳源,下列相关叙述正确的是( )
A.可推测该细菌的代谢类型为自养型
B.在该细菌的培养基中不必添加无机盐
C.培养过程中碳源同时充当该细菌的能源物质
D.培养该细菌的培养基中无须添加氮源
A 解析:根据题意可知,“某种细菌以CO2为唯一碳源”,说明该微生物为自养型微生物,A正确;无机盐是微生物生长的营养要素之一,B错误;该细菌以CO2为唯一碳源,但CO2不能为微生物提供能量,不能充当该微生物的能源物质,C错误;培养该细菌的培养基中需要添加氮源,D错误。
【思维升华】培养基的成分及功能
营养物质
作用
功能
主要来源
碳源
能为微生物代谢提供碳元素
构成生物体的细胞物质和一些代谢产物,有些是异养生物的能源物质
无机碳源:CO2、NaHCO3等;
有机碳源:糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等
氮源
能为微生物的代谢提供氮元素
合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物
无机氮源:N2、NH3、铵盐、硝酸盐等;
有机氮源:尿素、蛋白胨等
水
是生命活动所必需的
不仅是优良的溶剂,而且可维持生物大分子结构的稳定
外界摄入
无机盐
为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素,包括大量元素
细胞内的组成成分,生理调节物质,某些化能自养菌的能源,酶的激活剂
无机化合物
1.培养自养型微生物与异养型微生物的培养基,主要差别在于( )
A.碳源 B.氮源
C.无机盐 D.生长因子
A 解析:自养型微生物与异养型微生物的主要差别在于自养型微生物可以利用无机碳,异养型微生物只能以有机碳作为碳源,所以两种培养基的主要差别在于碳源。
2.回答下列与细菌培养相关的问题:
(1)在细菌培养时,培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是________(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常,制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH,其原因是________________________。硝化细菌在没有碳源的培养基上________(填“能够”或“不能”)生长,原因是_________。
(2)用平板培养细菌时一般需要将平板________(填“倒置”或“正置”)