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经典真题练03基因工程
黑题
应用提优练
限时:25min
(2021·湖北高考)限制性内切核酸酶EcoR I
相对含量较高的白色丝状物的处理方式是
识别并切割
5'-(AATT:-3′
3′-(TTAA(G-5
双链DNA,用EcoR I
A.加入适量的木瓜蛋白酶
B.37~40℃的水浴箱中保温10~15min
完全酶切果蝇基因组DNA,理论上得到DNA
C.加入与滤液体积相等的、体积分数为95%
片段的平均长度(碱基对)约为
(
的冷却的酒精
A.6
B.250
C.4000
D.24000
D.加入NaCl调节浓度至2mol/L→过滤→调
2.(2021·湖北高考)某实验利用PCR技术获取
节滤液中NaCl浓度至0.14mol/L
目的基因,实验结果显示除目的基因条带(引5.(2022·全国乙卷)新冠疫情出现后,病毒核
物与模板完全配对)外,还有2条非特异条带
酸检测和疫苗接种在疫情防控中发挥了重要
(引物和模板不完全配对)。为了减少反应非特
作用。回答下列问题。
异条带的产生,以下措施中有效的是
(I)新冠病毒是一种RNA病毒,检测新冠病
A.增加模板DNA的量
毒RNA(核酸检测)可以采取RT-PCR法。
B.延长热变性的时间
这种方法的基本原理是先以病毒RNA为
C.延长延伸的时间
模板合成cDNA,这一过程需要的酶
D.提高复性的温度
是
再通过PCR技术扩增相应
3.(2021·山东高考)我国考古学家利用现代人
的DNA片段。根据检测结果判断被检测
的DNA序列设计并合成了一种类似磁铁的
者是否感染新冠病毒。
“引子”,成功将极其微量的古人类DNA从提
(2)为了确保新冠病毒核酸检测的准确性,在
取自土壤沉积物中的多种生物的DNA中识别
设计PCR引物时必须依据新冠病毒RNA
并分离出来,用于研究人类起源及进化。下列
中的
来进行。PCR过程
说法正确的是
每次循环分为3步,其中温度最低的一
A.“引子”的彻底水解产物有两种
步是
B.设计“引子”的DNA序列信息只能来自
(3)某人同时进行了新冠病毒核酸检测和抗
核DNA
体检测(检测体内是否有新冠病毒抗体),
C.设计“引子”前不需要知道古人类的DNA
若核酸检测结果为阴性而抗体检测结果
序列
为阳性,说明
(答出1种
D.土壤沉积物中的古人类双链DNA可直接
情况即可);若核酸检测和抗体检测结果
与“引子”结合从而被识别
均为阳性,说明
4.(2021·山东高考)粗提取DNA时,向鸡血细
(4)常见的病毒疫苗有灭活疫苗、蛋白疫苗和
胞液中加入一定量的蒸馏水并搅拌,过滤后
重组疫苗等。已知某种病毒的特异性蛋
所得滤液进行下列处理后再进行过滤,在得
白S(具有抗原性)的编码序列(目的基
到的滤液中加入特定试剂后容易提取出DNA
因)。为了制备蛋白疫苗,可以通过基因
选择性必修第三册:RJ黑白题68
工程技术获得大量蛋白S。基因工程的基
限制酶切割,需在引物上添加相应的限制
本操作流程是
酶识别序列,该限制酶识别序列应添加在
6.(2022·湖南高考节选)水蛭是我国的传统中
引物的
(填“3'端”或“5'端”)。
药材,主要药理成分水蛭素为水蛭蛋白中重
(2)PCR扩增得到的P基因经酶切连接插入
要成分之一,具有良好的抗凝血作用。拟通
载体后,与编码LAG的序列形成一个融
过蛋白质工程改造水蛭素结构,提高其抗凝
合基因,如图甲所示,其中“ATGTGCA”为
血活性。回答下列问题:
P基因编码链起始序列。将该重组载体
(1)蛋白质工程流程如图所示,物质a
导入细胞后,融合基因转录出的mRNA序
是
,物质b是
。
在生产
列正确,翻译出的融合蛋白中FLAG的氨
过程中,物质b可能不同,合成的蛋白质
基酸序列正确,但P基因对应的氨基酸序
空间构象却相同,原因是
列与P不同。据图甲分析,出现该问题的
原因是
。修改扩
增P基因时使用的带有EcoR I识别序列
基因
蛋白质-预期功能
的引物来解决该问题,具体修改方案是
DNA
b
三雏结构
→生物功能
(2)蛋白质工程是基因工程的延伸,基因工程
中获取目的基因的常用方法有
重组载
BumHT
注:DA编码链
体的部侣动江
P基因终止子
为转录时所用模
分结构
板链的互补链
和
放大
编码LAG
的序列
EwRI■
BamHI
利用PCR技术扩增。PCR技术遵循的基
DVA编
ATG GAC.AAG GCG AATTCA TGT GCA...GGA TCC
码链氨
Met Asp-Tys Ala Asn Ser Cys Ala Gly SeT
本原理是
基酸序列
下I,A:
甲
(3)若要比较蛋白质工程改造后的水蛭素、上
(3)融合蛋白表达成功后,将FLAG-P、
述水蛭蛋白酶解产物和天然水蛭素的抗
FLAG-P△、药