2023届高三一轮复习微生物的培养

微生物的培养 1、微生物的营养要求： 微生物为了生存就必须从环境中吸取各种物质以合成细胞物质、提供能量以及调节新陈代谢。这类物质就称为营养物质，除了水以外，主要分为碳源、氮源、无机盐、生长因子四大类。 2、微生物培养基的种类： （1）培养基的含义：因科研和生产的需要，由人工配制的，适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质（混合养料）称为培养基。 （2）任何培养基都应具备微生物所需要的五大营养要素，且应比例适当，所以一旦配成必须立即灭菌。 3、配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤及注意事项： （1）步骤： 计算→称量→溶化→灭菌→倒平板 （2）注意事项： ①倒平板的温度一般在50°C左右适宜，温度过高会烫手，温度过低培养基又会凝固； ②倒平板的关键在于无菌操作，倒平板时不能把培养皿盖完全打开、倒放在桌面上，这样可能会污染培养基； ③冷却凝固的平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 4、灭菌和消毒的区别： （1）灭菌：是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 （2）消毒：是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。 5、常用的微生物接种方法： （1）平板划线法：是指通过接种环在琼脂固体培养基的表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释、分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体——菌落。每一次划线的前后都要灼烧接种环；灼烧接种环后，要进行冷却，然后再进行划线；划线时，最后一个区域不要和第一个区域相连。 （2）稀释涂布平板法： 稀释涂布平板是指将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。稀释涂布平板法包括两个过程：菌液系列稀释操作和涂布平板操作。 ①菌液系列稀释操作：稀释操作时，试管及其中的9ml的水都需要灭菌；试管口和移液管应在距离火焰旁的1-2cm处。 ②涂布平板操作：A、将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中；B、取少量菌液（不超过0.1ml），滴加到培养基表面；C、将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8-10s；D、用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面，涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀。 （3）两种方法优缺点的比较： 学科网（北京）股份有限公司 $