第1章 第2节 第2课时 微生物的选择培养和计数（Word教参）-【优化指导】2022-2023学年新教材高中生物选择性必修3 生物技术与工程（人教版2019）

第2课时　微生物的选择培养和计数 课程标准 核心素养目标 1.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。 2．概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。 3．概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。 1.通过实例理解各类微生物都能适应其生活环境。(生命观念) 2．根据微生物的代谢类型，配制选择培养基；总结分离微生物的过程和测定微生物数量的常用方法。(科学思维) 3．讨论土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验方法，并对实验结果进行评价。(科学探究) [对应学生用书P13] 知识点一 选择培养基 1.实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。 2．选择培养基概念：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 知识点二 微生物的选择培养 1.方法：对土样进行充分稀释，然后再将菌液涂布到制备好的选择培养基上。 2．稀释涂布平板法的操作过程 (1)系列梯度稀释操作 (2)涂布平板操作 ①取菌液：取0.1_mL菌液，滴加到培养基表面。 ②涂布器灭菌：取出浸在酒精中的涂布器，放在火焰上灼烧，待酒精燃尽，涂布器冷却后，再进行涂布。 ③涂布过程：用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面，涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。 3．培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入30～37 ℃的恒温培养箱中培养1～2 d，观察。 知识点三 微生物的数量测定 1.稀释涂布平板法 (1)统计依据 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 (2)操作 ①选用一定稀释范围的样品液进行培养，一般选择菌落数为30～300的平板进行计数。 ②在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。 2．显微镜直接计数：利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量。 知识点四 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1.提出问题：如何分离土壤中分解尿素的细菌？每克土壤样品中含有多少分解尿素的细菌？ 2．选择培养基的组成 组分 含量 提供的主要营养 KH2PO4 1.4 g 无机盐 Na2HPO4 2.1 g MgSO4·7H2O 0.2 g 葡萄糖 10.0 g 碳源 尿素 1.0 g 氮源 琼脂 15.0 g 凝固剂 H2O 定容至1 000 mL 水 3．实验设计 (1)土壤取样：先铲去表层土，取距地表3～8 cm的土壤层，将样品装入纸袋中。 (2)样品的稀释：一般选用1×104、1×105、1×106倍稀释的稀释液进行平板培养。 (3)微生物的培养与观察：细菌一般在30～37_℃的温度下培养1～2 d，每隔24 h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。 1．由于使用了选择培养基，因此本实验不需要设置对照组。(　　×　　) 提示：应该设置未接种的平板和接种在牛肉膏蛋白胨培养基上的平板作为对照。 2．在用涂布器涂布平板时，为了操作方便可完全打开培养皿盖。(　　×　　) 提示：为了防止杂菌污染，不能完全打开皿盖。 3．在同一稀释度下，至少要涂布3个平板。(　　√　　) 4．当菌落数目稳定时，选取菌落数为30～300的平板进行计数。(　　√　　) 5．统计菌落数目时，统计的菌落数就是活菌的实际数目。(　　×　　) 提示：由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。 6．因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离。(　　√　　) 7．只要培养基中有尿素即可筛选出分解尿素的细菌。(　　×　　) 提示：必须是以尿素为唯一氮源的培养基才能筛选出分解尿素的细菌。 8．配制培养不同微生物的培养基时都要将培养基调至中性或弱碱性。(　　×　　) 提示：不同微生物的最适生存环境也有差别，细菌适合中性或偏碱性的环境，真菌更适合偏酸性环境。 [对应学生用书P15] 探究一　微生物的选择培养 ►情境探究 绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。下表是筛选土壤中分解尿素的细菌的培养基配方。 KH2PO4 1.4 g Na2HPO4 2.1 g MgSO4·7H2O 0.2 g 葡萄糖 10.0 g 尿素 1.0 g 琼脂 15.0 g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL 1．从物理性质看，该培养基属于