内容正文:
第2章 细胞工程
应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的的原理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。
细胞工程
应用的方法
研究的水平
研究的目的
细胞生物学、分子生物学和发育生物学等
细胞器、细胞或组织水平
获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品
概念
分类
植物细胞工程
动物细胞工程
一 植物细胞工程的基本技术
植物组织培养技术
2.1 植物细胞工程
植物体细胞杂交技术
菊花的组织培养
探究·实践
【实验操作】
制备MS固体培养基
外植体消毒
接种
培养
炼苗
移栽
配制各种母液
配制培养基
调节pH、分装、封口
灭菌
70%酒精30s
无菌水清洗2~3次
次氯酸钠溶液30min
无菌水清洗2~3次
诱导愈伤组织
诱导生芽
诱导生根
试管苗
植物组织培养的培养基
无机营养成分:大量元素、微量元素
有机营养成分
① 含N物质:包括维生素和氨基酸
② 碳源:2%~5%的蔗糖
③ 琼脂:凝固剂,起支持作用
④ 相关激素:生长素,细胞分裂素
pH值:5.8
纤维素膜滤器
愈伤组织:离体的植物器官、组织或细胞,在培养一段时间以后,通过细胞分裂,形成一种高度液泡化、无定形状态,具有分生能力的薄壁细胞。
相关概念辨析
外植体:离体培养的植物器官、组织或细胞。
脱分化:已分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能,而转变成未分化细胞的过程。
再分化:脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,重新分化成根或芽等器官的过程。
相关概念辨析
1.为什么已分化的植物组织或细胞能培养成完整植株?
植物细胞具有全能性。
2.什么是细胞的全能性?
细胞经分裂和分化后,仍具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。
思考与讨论
生物的每一个细胞都有本物种的全套遗传物质,都有发育成完整个体的全套基因。
3.已分化的细胞为什么具有发育成完整个体的潜能?
在特定的时间和空间条件下,基因选择性表达的结果。
4.生物体内的细胞为什么没有表现出全能性,而是分化成不同的组织器官?
思考与讨论
5.细胞表现全能性的条件有哪些?
离体、营养物质、激素及其它适宜条件。
6.脱分化的实质和结果分别是什么?
实质:恢复细胞的全能性过程。
结果:形成愈伤组织。
外植体
愈伤组织
胚状体
植物体
脱分化
再分化
一、植物组织培养技术
已分化的离体组织或细胞
幼芽或幼根?
分化程度低,去分化较易。
①适宜温度、避光、 pH和无菌环境。
② IAA/CTK = 1
排列疏松、无规则;高度液泡化;无定形状态;薄壁细胞;
无叶绿体,不进行光合作用。
理论基础:
细胞的全能性
生芽:IAA/CTK < 1
生根:IAA/CTK > 1
植物组织培养是指在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织或细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生完整植株的技术。
植物的组织培养
1.有关全能性的表述中,不正确的是( )
A.受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完整个体,因此全能性最高
B.生物体内细胞由于分化全能性不能表达
C.卵细胞和受精卵一样,细胞未分化,全能性很高
D.在一定条件下,植物细胞离体培养能表现出全能性
练习与应用
C
全能性大小比较:
受精卵
生殖细胞
体细胞
>
>
2)
3) 植物细胞>动物细胞
1) 受精卵的全能性最高
4) 分化程度低的细胞>分化程度高的细胞
2.下列属于组织培养的是( )
A.花粉培养成单倍体植株
B.芽发育成枝条
C.根尖分生区发育成成熟区
D.未受精的卵发育成雄蜂
A
3.在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中,下列哪一项条件是不需要的( )
A.消毒灭菌
B.适宜的温度
C.充足的光照
D.适宜的养料和激素
C
番茄与马铃薯同属茄科植物,但不是同属植物。番茄的果实和马铃薯的块茎是我们经常食用的蔬菜。马铃薯块茎生长在土壤中。
人们曾经有这样一个幻想:让一株植株地上部分结番茄,地下部分长土豆。
这个幻想可能实现吗?
一个幻想?
理想图
因为不同种生物之间存在着生殖隔离,所以用传统的有性杂交方法是不可能做到这一点的。
于是,科学家试图用这两种植物的体细胞进行杂交,来实现这一美妙的设想。
这幅番茄—马铃薯图,利用传统有性杂交方法能实现吗?为什么?
理想图
二、植物体细胞杂交技术
杂种植株
融合的原生质体AB
脱分化
愈伤组织
再分化
植物体细胞杂交技术流程
植物体细胞融合
植物组织培养
植物细胞A
原生质体B
原生质体A
杂种细胞AB
去除