1.2 微生物的选择培养与计数-【轻松学生物】2022-2023学年高二生物同步教学精优课件（人教版2019选择必修3）

二 微生物的选择培养和计数 自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。 那么我们又如何达成这一目标呢？ 科学家们用选择性培养基解决了这一难题 一选择培养基 1973年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌，进而提取出耐高温的DNA聚合酶。 为什么水生栖热菌能从热泉中筛选出来呢？ 因为水生栖热菌能在70-80℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 启示 寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找 人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长 实验室中微生物的筛选： 要分离一种微生物，须根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等；配置合适的培养基 造成有利于该菌生长的环境；抑制大多数微生物生长 方法 实质 原理 思考 如何利用培养基筛选出能够分解尿素的微生物？ 以尿素为唯一氮源 选择培养基： 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 怎样证明此培养基具有选择性呢？ 牛肉膏蛋白胨培养基 分离能分解尿素的细菌 判断该培养基有无选择性 只生长能分解尿素的菌 以尿素为唯一氮源的培养基 生长多种微生物 如：加_______________可得到金黄色葡萄球菌。加________________筛选出抗青霉素的微生物。 选择培养基例证 青霉素的培养基 ①在培养基中加入某种化学物质 ②改变培养基中的营养成分 ③改变微生物的培养条件 如:缺乏______时可以分离固氮微生物。不加含___________的无碳培养基可将土壤中自养微生物分离出来 如：普通的培养基在______条件下分离厌氧型和兼性厌氧型微生物 高浓度的食盐 氮源 碳有机物 无氧 细菌利用尿素的原因 土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶 选择培养基配方的设计 尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素被土壤中某些细菌分解成NH3,再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。 讨论1、你如何设计培养基配方，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来？ 培养基添加尿素作唯一氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。缺乏脲酶的微生物因不能分解尿素、缺乏氮源而不能生长发育繁殖，故用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。 讨论2:该培养基与普通培养基有哪异同点？ ①从物理性质看此两培养基都属于__________,从功能上看该培养基属于____________. 固体培养基 ②在此培养基中，作为碳源的是____________、作为氮源的是_______。 葡萄糖、尿素 选择培养基 尿素 1.下列有关微生物筛选的叙述中，不正确的是 A．用全营养牛肉膏蛋白胨培养基筛选大肠杆菌 B．用高NaCl的培养基筛选抗盐突变菌株 C．含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的菌株 D．利用高温条件筛选耐热的Taq细菌 A 2.在培养基中加入尿素(唯一氮源)，以分离出能分解尿素的细菌，这种加入尿素的培养基在功能上属于(　　) A．选择培养基　　　 B．固体培养基 C．液体培养基 D．鉴别培养基 A 3.下面是某一课题将用到的培养基配方，请根据下表回答下面的问题： (1)在该培养基的配方中，为微生物提供碳源的是_______________，提供氮源的是______。 (2)绝大多数微生物能利用__________，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解________。 葡萄糖、尿素　 尿素　 葡萄糖　 尿素　 (3)分析该培养基的配方，该培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，又何进行选择的？ 有。以尿素为唯一氮源的培养基可以分离到产生脲酶的微生物(即分解尿素的微生物)。　 1、显微镜直接计数： 利用血球计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。容积 微生物的数量测定 小格样均值×400（格/o.1μm）×稀释倍数×量值（ml） 个体小而动的细菌难以计数且无法区分死与活 容积换算： 1ml=1000μm 2.酵母菌的计数通常用血球计数板进行，血球计数板每个大方格容积为0.1mm3 ，由400个小方格组成。现对某一样液进行检测，如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先            后再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有         个。 1.在用血球计数板对某一稀释50倍样品进行计数时，发现在一个计数室内(2mm*2mm方格) （盖玻片下的培养液厚度为0.1mm）酵母菌平均数为16，据此估算10mL培养液