第1章第2节 微生物的培养技术及应用—微生物的基本培养技术（课件）-2022-2023学年高二生物备课无忧（人教版2019选择性必修3）

向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌，再经过发酵就可以制成酸奶一般家庭自制酸奶可能会导致肠胃不适，主要原因是有杂菌混入。 那么怎么才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？ 第1章第2节微生物的培养与应用 第1课时 微生物的基本培养技术 1.概述培养基的配制方法。 2.说出常用的消毒和灭菌方法。 3.进行酵母菌的纯培养。 固体培养基 半固体培养基 液体培养基 主要用于微生物的分离、计数等 主要用于观察微生物的运动、鉴定菌种等 主要用于工业生产 需加入凝固剂，如琼脂 一、培养基的配制 2.种类 1.概念：由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养基质。 2 资料分析：1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成 培养基组分 提供的主要营养 牛肉膏5g 碳源、磷酸盐和维生素 蛋白胨10g 氮源和维生素 NaCl 5g 无机盐 H2O定容在1000mL 氢元素、氧元素 3.成分 一、培养基的配制 培养基还需要满足不同微生物生长对PH、氧气、特殊营养物质的要求： 如乳酸杆菌时需要添加维生素 ，霉菌需要将培养基pH调节为酸性 ，细菌时需要将pH调节为中性或微碱性 。 二、无菌技术 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 无菌操作是培养微生物成功的关键！ 1.消毒： 2.消毒与灭菌的比较 项目 理化因素作用强度 消灭微生物数量 芽孢和孢子是否消灭 消毒 灭菌 温和 强烈 部分微生物 全部微生物 不能 能 使用较为温和的物理、化学或生物等方法，杀死物体表面或内部一部分微生物。 2.灭菌： 使用强烈的理化方法杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子。 ①煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min ②巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min ③化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源 ④紫外线30min消毒：照射前，可喷石炭酸或煤酚皂等消毒液加强消毒效果 (1)消毒的方法： 4.常用的消毒与灭菌的方法 (2)灭菌的方法： ①灼烧灭菌：接种环、接种针、试管口、瓶口 二、无菌技术 ②干热灭菌：玻璃器皿和金属用具 ③高压蒸气灭菌： 100kPa、121 ℃下维持15-30min 问题1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 还能有效避免操作者自身被微生物感染。 问题2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1）培养细菌用的培养基与培养皿；（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管； （3）实验操作者的双手 （1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。 二、无菌技术 4.常用的消毒与灭菌的方法 细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌(　　) A.接种环、手、培养基 B.高压锅、手、接种环 C.培养基、手、接种环 D.接种环、手、高压锅 【方法点拨】灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力，对于培养基、操作器皿和接种环等都需要灭菌。消毒仅指杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害，如操作者的手和衣着需要消毒处理。高压蒸汽通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环。 C 三、微生物的纯培养 由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。 （一）概念： （二）内容： 1）配制培养基 2）灭菌 3）接种 4）分离 5）培养 分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体 1.菌落： 2.纯培养： 采用平板划线法和稀释涂布平板法将单个微生物分散在固体培养基上，之后得到的单菌落一般是由单个微生物形成的纯培养物。 微生物群 分散或稀释 单个细胞 单个菌落 繁殖 三、微生物的纯培养 （三）酵母菌的纯培养 3.原理： 4.方法步骤 1）配制培养基 称取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000ml，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖、15-20g琼脂，用蒸馏水定容至1000ml。（有时需调pH） 2）灭菌 将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15-30min。将5-8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160-170℃灭菌2h. 三、微生物的纯培养 （三）酵母菌的纯培养 制备培养基 ①在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞； ②右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰； ③左手将培养皿