1.2 微生物的培养技术及应用-【备课宝】2022-2023学年高二生物教学同步优质课件（人教版选择性2019必修3）

第2节 微生物的培养技术及应用 1.概念：一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。 2.分类： 细胞结构 核结构 微生物类群 无细胞 结构 无核 病毒、亚病毒(拟病毒、类病毒、朊病毒) 有细胞 结构 原核 古细菌、细菌、 放线菌、蓝细菌 真核 酵母菌、霉菌、 藻类、原生动物 微生物 真菌 酵母菌 青霉 毛霉 蘑菇 灵芝 木耳 C.弧菌 细菌 图 常见的三种细菌典型形态 A.球菌 B.杆菌 芽胞： 有些细菌在一定的条件下，细胞里形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽胞。 芽胞的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽胞，煮沸3小时以后才死亡。 芽胞又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜(如温度、水分适宜)的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌。 菌落： 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 大小、形状、光泽度、颜色、透明度等。 一 微生物的基本培养技术 1.提供营养和条件 2.防止污染 一.培养基： 微生物生存的环境和营养物质。 思考：微生物“吃”什么？ 固体培养基 液体培养基 有无 凝固剂琼脂 分离 鉴定 工业 生产 合成培养基 天然培养基 无有 不明确天然物质 培养基类型 简介： 伊红美蓝培养基(eosin-methylene blue medium，简称EMB medium)，一般用于检测大肠杆菌。 原理： 伊红为酸性染料，美蓝为碱性染料。当大肠杆菌分解乳糖产生大量的混合酸时，细菌带正电荷(H+)被染成红色，再与美蓝结合形成紫黑色菌落，从菌落表面的反射光中还可以看到绿色金属光泽。 培养基的类型及作用 划分标准 培养基种类 特点 用途 物理性质 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 半固体培养基 加凝固剂，如琼脂 观察微生物的运动、分类鉴定 固体培养基 微生物的分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种。 化学成分 天然培养基 含化学成分不明确的天然物质。 工业生产 合成培养基 培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成)。 分类、鉴别 用 途 选择培养基 允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他微生物生长。 培养、分离出特定微生物，如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度食盐。 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品。 鉴别不同种类的微生物，如用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽)。 配制原则 ⑴目的明确： ⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当 ⑶适宜的pH值： 有机碳源 异养型： 根据微生物的种类、培养目的选择原料 自养型： 不加碳源 加入缓冲剂 (CO2碳源) 生产 科研 牛肉膏蛋白胨培养基 ——应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方 培养基组分 含量 琼脂 20g 牛肉膏 5g 蛋白胨 10g Nacl 5g 水 定容至1000ml 1.基本成分： 碳源、氮源、水、无机盐 碳源 无机碳源： 有机碳源： CO2、CO32-、HCO3- 牛肉膏、蛋白胨等 自养型 异养型 氮源 无机氮源： 有机氮源： NH4+、NO3- 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 注：含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源。 2.特殊营养： 维生素、碱基等 (牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有) 3.pH： 4.氧气： 细菌pH为6.5–7.5 放线菌pH为7.5–8.5 真菌pH为5.0–6.0 厌氧型微生物需提供无氧环境。 二.无菌技术： 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 1.消毒： 较为温和理化方法，杀死物体表面或内部部分微生物(不包括芽孢、孢子)。 70~75℃、30min 80℃、15min 100℃、5~6min 煮沸消毒法 巴氏消毒法 化学药剂(附录5-P86) 紫外线(附录4-P85) 酒精擦拭双手； 氯气消毒水源； 石炭酸、煤酚皂等喷洒接种室、超净工作台。 紫外灯照射30min 超净工作台 高浓度酒精能将细菌表面的蛋白质凝固，并形成一层保护膜，阻止酒精进入细菌体内，因而不能将细菌彻底杀死。 酒精浓度低于70%，虽可进入细菌体内，但不能将细菌彻底杀死。只有70%-75%的酒精即能顺利地进入到细菌体内，又能有效地将细菌体内的蛋白质凝固，因而可彻底杀死细菌。 利用酒精消毒时，酒精浓度是不是越高越好？ 思考 2.灭菌： 强烈的理化方