1.2.2 微生物的选择培养和计数(第1课时)-【爱上生物课】2022-2023学年高二生物优质精讲课件（人教版2019选择性必修3）

第2节 微生物的培养技术及应用 二 微生物的选择培养和计数（第1课时） 1 自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合的菌群中不是优势种群时，仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。该怎么办呢？ 1973年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌( Thermus aquaticus)，进而从这种菌中提取出耐高温的DNA聚合酶。这种酶目前已被广泛用于体外扩增DNA片段的聚合酶链式反应(PCR)。 这是因为水生栖热菌能在 70-80 ℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 讨论 1.为什么水生栖热菌能从热泉中被筛选出来呢？ 2.以上例子给我们在分离纯化微生物带来什么启示？ 实验室中，人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和pH等) ，同时抑制或阻止其他微生物的生长，从而筛选特定的微生物。 根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 人为提供有利于目的菌生长，同时抑制或阻止其他微生物生长的条件，进行实验室微生物的筛选。 选择培养基 耐寒微生物 石油分解菌 被石油污染的土壤 冰川冻土层 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 一、选择培养基 1. 定义 类型 条件 分离得到的菌种 （1）改变培养条件 （2）添加某种化学物质 （3）营养缺陷 70～80℃的高温 水生栖热菌 2.类型 加入青霉素 酵母菌、霉菌等真菌 高浓度食盐 金黄色葡萄球菌 不加碳源 不加氮源 自养型微生物 固氮菌 培养基中加氨苄青霉素 具有抗氨苄青霉素能力的菌落 长出各种各样的细菌 培养基+氨苄青霉素 没有抗氨苄青霉素能力的菌落被淘汰 怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌? 培养基 一、选择培养基 项目 选择培养基 鉴别培养基 原理 用途 举例 图示 尿素分解菌 大肠杆菌 加入某种指示剂或化学药品(不 影响微生物正常生长)，使微生 物的某种代谢产物与培养基中 的特定指示剂或化学药品发生反应 培养、分离出目标微生物 鉴别目标微生物 培养酵母菌和霉菌时，可在培养基 中加入青霉素，抑制细菌的生长； 利用以尿素为唯一氮源的培养基来 培养可分解尿素的细菌 可用伊红美蓝培养基鉴定饮用 水或乳制品中是否含有大肠 杆菌(若有，则菌落呈黑色) 加入不影响甚至促进目标微生 物生长，而抑制或阻止其他种 类微生物生长的化学物质 拓展延伸 怎么证明一个选择培养基具有选择性呢？ 应该设置基础培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）或完全培养基作为对照，若基础培养基或完全培养基中生长的菌落数菌多于该选择培养基，则该选择培养基具有选择性。 基础培养基 选择培养基 那么如果让你分离土壤中分解尿素的细菌，你应该怎么设计呢？ 尿素的立体结构 尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。 尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH3，再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。 而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶。 CO(NH2)2 脲酶 + H2O + CO2 2NH3 在选择培养基中，以尿素作为唯一氮源，只有能合成脲酶的细菌才能生长发育繁殖。 1.如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？ 除以尿素作为唯一氮源外，该培养基的其他营养成分与普通培养基基本相同。 选择培养基配方的设计 讨论 配方： 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 琼脂 15.0g 蒸馏水 1000ml 碳源 氮源 ①提供无机盐； ②调节pH。 凝固剂 选择培养基配方的设计 1.从物理性质来讲，两者属于_____培养基， 判断依据是_________________________________； 该类培养基的主要用途为_____________________； 2.从用途上来讲，培养基二属于______培养基， 目的是为了获得_____________________； 3.两种培养基共有的培养基成分有：________________________； 培养基一的碳源为________，氮源为________； 培养基二的碳源为________，氮源为________。 培养基一 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g 蒸