专题39 实验室微生物的培养-备战2023年高考生物复习思维导图

微生物的概念微生物是难以用肉眼看观察的微小生物的统称，包括细菌、真菌、病毒、放线菌及一些原生生物等 实验室培养微生物的基本原则 0一方面要为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件 ?另一方面要确保其他微生物无法混入，并将需要的微生物分离出来 液体培养基一不含凝固剂（如琼脂）、呈液体状态的培养基 物理性质 固体培养基—呈固体状态的培养基（加入凝固剂，如琼脂） 选择培养基—在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长 培养基的种类 鉴别培养基在培养基中加入某种指示剂或化学药品，用以鉴别不同种类的微生物 功能 培养基 天然培养基一用化学成分不明确的天然物质配制 成分来源 合成培养基一用已知的化学物质配制 般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐等营养物质 培养基的营养组成 还需要满足微生物生长对H、特殊营养物质以及02的需求 0乳酸杆菌一添加维生素一②霉菌pH调至酸性一③细菌pH调至中性或弱碱性 获得纯净培养物的关键—防止杂菌污染 具体操作 0消毒和灭菌一②实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行 无菌技术的作用—无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效避免操作者自身被微生物感染 概念使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物 0煮沸消毒法一100℃，煮沸5~6ninD巴氏消毒法62广65℃消毒30min或8090C处理3081min 无菌 消毒十方法 ③化学药剂消毒法一用体积分数为70%~75%的乙醇、碘酒；石炭酸、煤酚皂溶液；一定浓度的乳酸、食醋 技术 ④紫外线消毒一紫外线照射30min 适用对象操作空间、操作者的衣着和手等 概念 使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 实 湿热灭菌利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌的方法。其中高压蒸汽灭菌效果最好，100kPa、121℃维持15~30min 验 灭菌 方法 干热灭菌在干热灭菌箱内，160~170℃条件下，加热2~3h 室 灼烧灭菌一直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速地灭菌 微 适用对家—器皿、接种用具、培养基等 生 在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。由单一个 微生物纯培养的概念 物 体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养 菌落一分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。 的 纯培养方法—一 平板划线法—②稀释涂布平板法 培 纯培养的原理一将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物（单菌落） 养 微生物纯培养的步骤一包括配制培养基、灭菌、倒平板、接种、分离和培养等 倒平 微生 养基灭菌后需要冷却至50℃左右时才能倒平板。一若温度过高：侧则培养基固后盖上冷水过多，落入培养基造成污 板的 若温度过低，则培养基又会凝固 物的 操作 纯培 要点 将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不要完全打开，以免杂菌污染培养基整个操作过程要在酒精灯火焰旁进行，避免杂菌污染。 养 灼烧接种环→冷却→蘸取菌液→ 第1次划线前灼烧接种环的目的：杀死接种环上原有的微生物，防止外来微生物干扰 划线（第1次）→灼烧接种环→冷 灼烧接种环后，要冷却后才能进行操作一以免温度太高杀死菌种 却→从上一次划线未端划线（第2 平板 2$次划线前灼烧的目的。_杀死上次划线后残留在接种环上的菌种，使下次划线的菌种直接来 次)→灼烧接种环→冷却→从上 划线 自上次划线末端，使每次划线菌种数目减少，达到分离菌种的目的 一次划线末端划线（第3次)→灼 法 第二次及其以后的划线操作能使微生物的数目随着划线次数的增加而逐渐减 烧接种环→冷却→从上一次划线 总是从上一次划线末端开始少，最终得到由单个细胞繁殖而来的菌落 末端划线（第4次）→灼烧接种环 最后一次的划线不要与第一次的划线相连 →冷却→从上一次划线末端划线 (第5次)→灼烧接种环 实验室中微生物的筛选原理一人为提供有利于目的菌生长的条件（包括营养、温度和H等），同时抑制或阻止其他微生物的生长 允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基 选择培养基 实例：设计培养基把土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来 用尿素作为唯一氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，在培养基上生长，可以将分解尿素的细菌分离出来 在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值 微生物的选择 操作要点 培养和计数 一般选择菌落数为30~300的平板进行计数 微生