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第1章 发酵工程
第2节 微生物的培养技术及应用
第1课时 微生物的基本培养技术
[学习目标]
1.说明培养基的概念、种类及营养成分的种类和作用。
2.通过学习消毒和灭菌的方法,认识二者的异同。
3.运用微生物纯培养原理和无菌技术,通过平板划线法接种并分离得到酵母菌单菌落,对实验结果进行分析与评价。
第1课时 微生物的基本培养技术
[对应学生用书第7页]
一、培养基的配制
1.培养基:人们按照微生物对 营养物质 的不同需求,配制出供其 生长繁殖 的营养基质。
2.培养基的种类
按物理性质分类
营养物质
生长繁殖
第1课时 微生物的基本培养技术
3.培养基的营养组成:各种培养基一般都含有 水 、 碳源 、 氮源 和无机盐等营养物质,此外还需要满足微生物生长对 pH 、特殊营养物质以及 O2 的需求。
水
碳源
氮源
pH
O2
第1课时 微生物的基本培养技术
二、无菌技术
1.获得纯净的微生物培养物的关键:防止 杂菌污染 。
2.消毒和灭菌
杂菌污染
消毒 灭菌
概念 使用较为 温和 的物理、化学或生物等方法杀死物体 表面 或内部一部分微生物 使用 强烈 的理化方法杀死物体内外 所有 的微生物,包括 芽孢和孢子
温和
表面
强烈
所有
芽孢和孢
子
第1课时 微生物的基本培养技术
消毒 灭菌
常用方法 煮沸 消毒法、巴氏消毒法、 酒精 消毒法、紫外线消毒法 湿热 灭菌、干热灭菌、 灼烧 灭菌
适用对象 操作空间、操作者的衣着和双 手等 接种环、接种针、玻璃器皿、培养
基等
煮沸
酒精
湿热
灼烧
第1课时 微生物的基本培养技术
3.具体操作
(1)对实验操作的 空间 、操作者的衣着和手进行清洁和 消毒 。
(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行 灭菌 。
(3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在 酒精灯火焰 附近进行。
(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 周围的物品 接触。
空间
消毒
灭菌
酒精灯火焰
周围的物品
第1课时 微生物的基本培养技术
三、微生物的纯培养
1.纯培养:在微生物学中,将接种于 培养基 内,在合适条件下形成的含 特定种类微生物 的群体称为培养物。由 单一个体繁殖 所获得的微生物群体称为纯培养物,获得 纯培养物 的过程就是纯培养。
2.微生物纯培养的步骤:配制培养基、 灭菌 、 接种 、分离和培养等。
培养基
特定种
类微生物
单一个体繁殖
纯培养物
灭菌
接种
第1课时 微生物的基本培养技术
3.酵母菌的纯培养
(1)菌落:分散的微生物在适宜的 固体培养基 表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的 子细胞群体 。
(2)获得单菌落的方法: 平板划线 法和 稀释涂布平板 法。
固体培养基
子细胞群体
平板划线
稀释涂布平板
第1课时 微生物的基本培养技术
(3)酵母菌的纯培养步骤
①制备培养基
第1课时 微生物的基本培养技术
②接种和分离酵母菌:通过 接种环 在固体培养基表面连续划线的操作,将聚
集的菌种逐步 稀释分散 到培养基的表面。
③培养酵母菌:完成平板划线后,待菌液被培养基吸收,将接种后的平板和 一个未
接种 的平板 倒置 ,放入28 ℃左右的 恒温培养箱 中培养
24~48 h。
接种环
稀释分散
一个未
接种
倒置
恒温培养箱
第1课时 微生物的基本培养技术
判断正误,正确的打“√”,错误的打“×”。
(1)液体培养基含有水,而固体培养基不含水。( × )
(2)获得纯净微生物培养物的关键是防止杂菌污染。( √ )
×
√
(3)用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基都要进行消毒。( × )
(4)培养基分装到培养皿后进行灭菌。( × )
×
×
第1课时 微生物的基本培养技术
√
√
(5)平板冷凝后应将平板倒置,防止皿盖上的冷凝水落入培养基,造成污染。( √ )
(6)转换划线角度后需要灼烧接种环再进行划线。( √ )
第1课时 微生物的基本培养技术
[对应学生用书第8页]
知识点一 培养基的配制
下表是培养基的配方,请分析后回答:
材料 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水
用量 5 g 10 g 5 g 20 g