内容正文:
第2节 动物细胞工程
第1课时 动物细胞培养
[学习目标]
1.概述动物细胞培养需要的基本条件。
2.简述动物细胞培养的基本操作过程。
3.说出干细胞的分类及作用。
[对应学生用书第37页]
一、动物细胞培养的概念
动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
二、动物细胞培养的条件
1.无菌毒的环境、毒的环境无毒的环境
2.营养
3.温度和pH
4.气体环境
三、动物细胞培养的过程
填一填:基于动物细胞培养的过程,回答下面的问题:
(1)过程①处理方法有:机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法。
(2)过程②为原代培养,培养的动物细胞有两类:
A.悬浮在培养液中生长增殖;
B.贴附于某些基质表面生长增殖。
(3)进行过程③时,悬浮培养的细胞直接用离心法收集;贴壁细胞需要使用胰蛋白酶等处理,然后用离心法收集。
(4)过程③为传代培养,进行过程③的原因主要有:细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏和接触抑制等。
四、干细胞的培养及其应用
1.干细胞功能:在一定条件下,可以分化成其他类型的细胞。
2.干细胞的存在:早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中。
3.干细胞的种类
(1)胚胎干细胞
(ES细胞)
(2)成体
干细胞
(3)诱导多能干细胞
(iPS细胞)
判断正误,正确的打“√”,错误的打“×”。
(1)肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸。 (×)
(2)动物细胞培养技术的原理是动物细胞的全能性。 (×)
(3)制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织,再用胃蛋白酶处理。 (×)
(4)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞。 (×)
[对应学生用书第38页]
知识点一 动物细胞培养的条件及过程
如图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据图回答问题:
(1)动物细胞培养过程需要什么样的条件?
提示:动物细胞培养需要营养,无菌、无毒的环境,适宜温度、pH和渗透压,适宜气体环境等条件。
(2)动物细胞培养的基本操作过程是什么?
提示:取动物组织→制成细胞悬液→转入培养液中进行原代培养→放入CO2培养箱中培养→传代培养→放入CO2培养箱中培养。
(3)动物细胞培养和植物组织培养一样可以获得完整个体吗?
提示:动物细胞培养时细胞只进行生长和增殖,不能得到完整个体,但是植物组织培养可以获得完整个体。
(4)动物细胞培养过程中有接触抑制现象,这一现象说明了细胞膜具有什么功能?细胞膜接收信息后,细胞停止分裂又说明了什么?
提示:细胞培养过程中的接触抑制说明了细胞膜能进行细胞间的信息交流。细胞膜接收信息后,细胞停止分裂,说明了细胞膜接收的信息能够传递到细胞核。
1.动物细胞培养过程中酶的处理
(1)用酶“两次”处理的目的:第一次使用的目的是使组织细胞分散开;第二次使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来,便于分散后继续培养。
(2)使细胞分散开的原因:一是能保证细胞所需要的营养供应;二是能保证细胞内有害代谢物的及时排出。
(3)不能用胃蛋白酶处理:由于大多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4,而胃蛋白酶发挥作用的适宜的pH为0.9~1.5,因此不能用胃蛋白酶使细胞分散开。
2.原代培养和传代培养
区分原代培养和传代培养的关键是看用胰蛋白酶处理的对象:
(1)第一次:用胰蛋白酶对剪碎的动物组织进行处理,使其分散成单个细胞后进行培养,为原代培养。
(2)第二次:细胞培养过程中出现接触抑制,用胰蛋白酶使其从瓶壁上脱离下来,然后,将其分散到多个培养瓶中继续培养,为传代培养。
3.动物细胞培养与植物组织培养的比较
比较内容
动物细胞培养
植物组织培养
理论基础
细胞增殖
植物细胞的全能性
前处理
无菌;用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理,使组织分散成单个细胞
无菌、离体
续表
比较内容
动物细胞培养
植物组织培养
取材
动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织
植物幼嫩的部位或花药等
培养基
成分
糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等
水、矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素和琼脂等
应用
人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产
快速繁殖、脱毒苗的培育、细胞产物的工厂化生产和单倍体育种等
相同点
①都需人工条件下的无菌操作
②都需要适宜的温度、pH等条件
③都进行有丝分裂、都不涉及减数分裂
3.下列关于动物细胞培养的叙述中,正确的是 ( )
A.动物细胞培养的目的就是获得分泌蛋白
B.动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散开
C.动物细胞培养通常不会出现接触抑制现象
D.可以通过细胞培养技术获得完整的动物个体
解析 动物细胞培养的目的有时是为了获得分泌蛋白,有时是为了获得更多的细胞,