内容正文:
高中生物竞赛
《生物化学简明教程》
魏民、张丽萍、杨建雄
13/16,DNA的生物合成
复制:以DNA作为模板指导的DNA合成,即将DNA携带的信息传至子代DNA。
反转录:DNA合成也可以RNA为模扳指导合成作用,见于RNA病毒。
修复合成:当各种因素引起DNA损伤时,损伤DNA可修复合成,校正错误,完成正确合成,以保持DNA结构 的稳定性和遗传信息的准确性。
DNA的重组与克隆
13/16.DNA的生物合成
细胞、个体及物种的遗传特性要在代代相传中得到维持,有赖于遗传物质的完整、准确的复制并分配至子代细胞。
现代生物化学和分子生物学的一个最基本的观点—— 在生命有机体中,基因是唯一能够复制,并且能永远存在的单位, 而其意义最终须通过蛋白质才体现出来。
从DNA到蛋白质,遗传信息的流动遵循着中心法则
亲本DNA双螺旋解开,两条链分别作为模板,合成子代DNA分子的过程
DNA复制过程的研究一般采用三类系统
ΦX174 DNA或质粒DNA及其完成复制所必需的酶、蛋白质及其因子构成的体外系统
以E.coli为模式生物,研究原核生物的复制
以酵母和动物病毒为模式生物研究真核生物的DNA复制
13/16.DNA的生物合成
13.1 DNA复制的概况
即新的双链DNA中,一股链来自模板,一股链为新合成的
复制的这种方式可保证亲代的遗传特征完整无误的传递给子代,体现了遗传的保守性
1958年Meselson和Stahl用同位素15N标记大肠杆菌DNA,首先证明了DNA的半保留复制
13/16.DNA的生物合成
13.1 DNA复制的概况
13.1.1 DNA的半保留复制
‖‖‖
13/16.DNA的生物合成
13.1 DNA复制的概况
13.1.1 DNA的半保留复制
13/16.DNA的生物合成
13.1 DNA复制的概况
13.1.1 DNA的半保留复制
基因组能独立进行复制的单位称为复制子,每个复制子都含有控制复制起始的起点,可能还有终止复制的终点
大多数原核生物染色体DNA的复制是双向,形成复制眼,单向复制的特殊形式,称为滚动环式
真核生物染色体DNA是线形双链分子,含有许多复制起点,因此是多复制子。
13/16.DNA的生物合成
13.1 DNA复制的概况
13.1.2 DNA复制的起点和方向
‖‖‖
13/16.DNA的生物合成
13.1 DNA复制的概况
13.1.2 DNA复制的起点和方向
DNA复制的特点与条件
(1)半保留复制
(2)有一定的复制起始点
(3)需要引物
(4)双向复制
(5)半不连续复制
(6)复制方向5´→3´
13/16.DNA的生物合成
13.1 DNA复制的概况
13.1.2 DNA复制的起点和方向
A. 环状双链DNA及复制起始点
B. 复制中的两个复制叉
C. 复制接近终止点(termination,,ter)
ori
ter
A B C
13/16.DNA的生物合成
13.1 DNA复制的概况
13.1.2 DNA复制的起点和方向
原料: dNTP,Mg2+ ,双链DNA模板
引物:小片段的DNA或RNA,常是RNA,有游离的 3´-OH。
引物酶:用于合成复制所必需的RNA引物
解螺旋酶: DnaB, 由DnaA和DnaC协助在复制的起始点(Ori C)上解开双螺旋。
单链结合蛋白:稳定已经解开成两股的DNA单链。
拓扑异构酶:解DNA 分子中存在打结,缠绕、连环的超螺旋现象。
DNA连接酶:连接DNA双链中的单链缺口
DNA聚合酶:复制酶,兼有校读、纠错
13/16.DNA的生物合成
13.2 原核生物DNA的复制
13/16.DNA的生物合成
13.2 原核生物DNA的复制
13.2.1 参与原核DNA复制的酶和蛋白质
1.原核生物的DNA聚合酶
pol I pol II pol III
不同种类亚基数目 1 ≥7 ≥ 10
每个细胞的分子数 400 20
生物学活性 1 0.05 15
5´→3´聚合酶活性 + + +
3´→5´外切酶活性 + + +
5´→3´外切酶活性 + - -
聚合速度(核苷酸/S) 16~20 40 250~1000
连续合成能力(核苷酸) 3~200 1500 ≥ 5000
功能 校正,去除RNA引物 应急修复 主要酶
13/16