内容正文:
第44课 基因工程
普查讲 44Ⅰ 基因工程
1.基因工程的概念
(1)(多选)(2022汇编,3分)下列关于基因工程的叙述,正确的是( )
A.基因工程是细胞水平上的生物工程
B.基因工程的生物学原理是基因突变
C.基因工程的最终目的是定向地改造生物的遗传性状
D.基因工程成功的原因之一是所有的生物共用一套遗传密码
E.基因工程可以克服远缘杂交不亲和的障碍
答案:CDE
解析:基因工程是在DNA分子水平上的操作,不是在细胞水平上的操作,故A项错误。基因工程的生物学原理是基因重组,故B项错误。基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿直接定向地改变生物、培育出新品种,所以基因工程的最终目的是定向地改造生物的遗传性状,故C项正确。基因工程成功的原因之一是所有生物共用一套遗传密码,这样才能保证一种生物的基因可以在另一种生物的体内表达,故D项正确。基因工程可以将一个物种的基因转移到另一个物种,克服了远缘杂交不亲和的障碍,故E项正确。
2.基因工程的操作工具
(2)(多选)(2022汇编,3分)下列有关基因工程中操作工具的叙述,正确的是( )
A.一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列
B.限制酶可用于提取目的基因,主要存在于微生物体内
C.DNA连接酶的本质是一种分泌蛋白,可用于目的基因与运载体的结合
D.DNA复制时,DNA连接酶可催化子链上的核苷酸之间形成磷酸二酯键
E.DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端连接起来,而不能将双链DNA片段的平末端连接起来
F.质粒都含有标记基因和限制酶识别位点,故常作为基因工程的载体
G.某种细菌质粒可作为基因工程的载体,则该质粒是由DNA分子与蛋白质构成的
答案:AB
解析:限制酶具有特异性,一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列,故A项正确。限制酶可用于提取目的基因和切割载体,主要从原核生物中分离纯化出来,故B项正确。DNA连接酶可分为E·coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶,可用于连接目的基因和运载体形成重组质粒,但其不是分泌蛋白,故C项错误。DNA复制时,催化子链上的核苷酸之间形成磷酸二酯键的是DNA聚合酶,故D项错误。DNA连接酶中的T4 DNA连接酶既能连接黏性末端,也能连接平末端,只不过连接平末端的效率较低,故E项错误。天然的质粒不能直接作为载体,基因工程中被用作载体的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的,因此质粒不一定都含有限制酶切割位点和标记基因,故F项错误。质粒是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外,并具有自我复制能力的小型双链环状DNA分子,不含蛋白质,故G项错误。
(3)(经典题,2分)如图为DNA分子的某一片段,其中①、②、③分别表示某种酶的作用部位,则相应的酶依次是( )
A.解旋酶、限制酶、DNA连接酶
B.解旋酶、限制酶、DNA酶
C.解旋酶、限制酶、DNA聚合酶
D.解旋酶、DNA连接酶、限制酶
答案:A
解析:分析题图可知,①是氢键,是解旋酶的作用位点,②是磷酸二酯键,限制酶可将其切开,DNA连接酶可作用于③,将两个DNA片段之间的磷酸二酯键连接起来,故A项符合题意。
3.基因工程的基本操作程序
a.目的基因的获取和PCR技术
(4)(2020江苏单科,8分)如果已知一小段DNA的序列,可采用PCR的方法,简捷地分析出已知序列两侧的序列,具体流程如图(以EcoRⅠ酶切为例):
请据图回答问题:
①步骤Ⅰ用的EcoRⅠ是一种______________________酶,它通过识别特定的____________________切割特定位点。
②步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3′-羟基与5′-磷酸间形成______________;PCR循环中,升温到95 ℃是为了获得________________________;Taq DNA聚合酶的作用是催化____________________________________________。
③若表中所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物,步骤Ⅲ选用的PCR引物必须是____________(从引物a、b、c、d中选择,填字母)。
④对PCR产物测序,经分析得到了片段F的完整序列。下列DNA单链序列中(虚线处省略了部分核苷酸序列),结果正确的是________________。
A.5′-AACTATGCG……AGCCCTT-3′
B.5′-AATTCCATG……CTGAATT-3′
C.5′-GCAATGCGT……TCGGGAA-3′
D.5′-TTGATACGC……CGAGTAC-3′
答案:①限制性核酸内切(或限制)(1分) 核苷酸序列(1分) ②磷酸二酯键(1分) DNA单链(1分) 以DNA为模板的DNA链的延伸(