内容正文:
[对应学生用书P58]
1.对照实验设计的三大原则和三类变量
(1)三大原则
①单一变量原则:即除自变量(实验变量)以外,应使实验组与对照组的无关变量保持相同且适宜。如生物材料相同(大小、生理状况、年龄、性别等)、实验器具相同(型号、洁净程度等)、实验试剂相同(用量、浓度、使用方法等)和条件相同(保温或冷却、光照或黑暗、搅拌、振荡等)。
②对照原则:应设置对照实验,使实验组与对照组的自变量不同(其他因素都相同),以便消除无关变量对实验结果的影响,增强实验结果的可信度。
③平行重复原则:在实验设计中为了避免实验结果的偶然性,必须对所做实验进行足够次数的重复,以获得多次实验结果的平均值,保证实验结果的准确性。
(2)三类变量
2.有关探究酶特性的常见实验设计
(1)“对比实验法”探究酶的催化作用
对照组:反应物+清水→反应速率慢或无反应;
实验组:反应物+等量的相应酶溶液→反应速率快。
(2)“对比实验法”探究酶的高效性
对照组:反应物+无机催化剂→反应速率慢;
实验组:反应物+等量酶溶液→反应速率快。
实验中自变量是无机催化剂和酶,因变量是反应物分解速率。
示例
(3)“对比实验法”探究酶的专一性
①设计思路一:换反应物不换酶。
实验组:反应物+相应酶溶液→反应物被分解;
对照组:另一反应物+等量相同酶溶液→反应物不被分解。
示例
②设计思路二:换酶不换反应物。
实验组:反应物+相应酶溶液→反应物被分解;
对照组:相同反应物+等量另一种酶溶液→反应物不被分解。
示例
(4)“梯度法”探究影响酶活性的因素(温度或pH)
①探究温度对酶活性影响的实验设计思路
方案一:(以唾液淀粉酶为例)
方案二:(此方案可探究酶的适宜温度)
②探究pH对酶活性影响的实验设计思路
方案一:(以H2O2酶为例)
方案二:(此方案可探究酶的适宜pH)
[拓展归纳]
有关酶活性实验探究中的“不宜”
(1)反应物和酶的选择方面
①研究酶的适宜温度实验时,不宜选用过氧化氢酶催化H2O2的分解,因为过氧化氢在加热的条件下会加快分解。
②研究酶的适宜pH实验时,由于酸对淀粉有分解作用,并且碘—碘化钾可与碱反应,反以一般不宜选用淀粉和淀粉酶作为实验材料,常选用H2O2和过氧化氢酶。
(2)检测时试剂的选择方面
①研究温度对酶活性影响的实验时,检测淀粉是否分解可用碘液,一般不宜选用斐林试剂,因为斐林试剂检测还原糖时需水浴加热,而该实验中需严格控制温度。
②若物质反应前后均能与检测试剂发生反应,例如麦芽糖以及其水解后形成的葡萄糖均能与斐林试剂反应,再如蛋白质以及其水解后形成的多肽均能与双缩脲试剂反应,则此类试剂不宜选用。
③若物质反应前后均不能与检测试剂反应,例如蔗糖以及其水解后的单糖均不能与碘液反应,则此类试剂也不宜选用。
[微专特训]
1.(2021·浙江卷)下列关于酶的特性及其影响因素相关实验的叙述,正确的是( )
A.“酶的催化效率”实验中,若以熟马铃薯块茎代替生马铃薯块茎,实验结果相同
B.“探究pH对过氧化氧酶的影响”实验中,分别加入不同pH的缓冲液后再加入底物
C.“探究酶的专一性”实验中,设置1、2号试管的目的是检验酶液中是否混有还原糖
D.设温度对蛋白酶活性影响的实验方案时,可选择本尼迪特试剂检测反应产物
解析 熟马铃薯块茎中酶已经失活,用其代替生马铃薯块茎,实验结果不相同,A错误;“探究pH对过氧化氧酶的影响”实验中,不同pH为自变量,在酶溶液中分别加入不同pH的缓冲液后,再与底物混合,以保证反应pH为预设pH,B正确;“探究酶的专一性”实验中,设置1、2号试管的目的是检验淀粉溶液和蔗糖溶液中是否混有还原糖,C错误;探究温度对蛋白酶活性影响的实验中,温度作为自变量,而本尼迪特试剂检验还原糖需要水浴加热,会改变实验温度,影响实验结果,故不能选择本尼迪特试剂检测反应产物,D错误。
答案 B
2.(2022·河南省实验中学模拟)普通淀粉酶的最适温度在40~60 ℃之间,而极端耐热淀粉酶在100 ℃仍能保持较高活性,在生产上具有更为广泛的应用前景。若要设计实验探究极端耐热淀粉酶起催化作用的最适温度。下列说法错误的是( )
A.要鉴定该酶的化学本质可利用双缩脲试剂,若反应液呈紫色,则该酶的化学本质为蛋白质。
B.测定淀粉酶活性时,选择淀粉作为该酶底物,反应液中应加入(酸碱)缓冲溶液以维持其酸碱度稳定
C.此实验中除自变量和因变量外,还需要考虑淀粉溶液的浓度和含量、pH及添加试剂的量、实验操作顺序等因素
D.设置一个实验组,调节环境自40 ℃缓慢升至100 ℃。测定反应速率最大时的环境温度即为最适温度
解析 蛋白质和双缩脲试剂产生紫色反应,鉴定该酶的化学本质可利用双缩脲试剂,若反应液呈紫色,则该酶的化学本质为蛋白质,A正确;为保证pH的稳定,反应液中应