内容正文:
第36讲 基因工程和生物技术的安全性与伦理问题
四层——高考考什么
四翼——高考怎么考
1.概述基因工程是在遗传学、微生物学、生物化学和分子生物学等学科基础上发展而来的。
2.阐明DNA重组技术的实现需要利用限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体三种基本工具。
3.阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞和目的基因及其表达产物的检测鉴定等步骤。
4.举例说明基因工程在农牧、食品及医药等行业的广泛应用改善了人类的生活品质。
5.概述人们根据基因工程原理,进行蛋白质设计和改造,可以获得性状和功能更符合人类需求的蛋白质。
6.举例说明依据人类需要对原有蛋白质结构进行基因改造、生产目标蛋白的过程。
7.探讨转基因技术在应用过程中带来的影响。
8.中国禁止生殖性克隆人。
9.世界范围内应全面禁止生物武器。
1.本讲是高考的高频考点,对基因工程的操作工具、操作程序的考查主要侧重基础性和综合性,对基因工程的应用的考查则侧重创新性和应用性。
2.高考越来越注重考生的迁移运用能力和解决实际问题的能力的考查,预计今后高考试题很可能结合科研实践或科学实践情境,分层设置问题,多角度考查考生的科学思维和科学探究等核心素养。
考点一 重组DNA技术的基本工具
1.基因工程的概念
(1)手段:按照人们的愿望,通过转基因等技术,赋予生物新的遗传特性。
(2)目的:创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
(3)操作水平:分子水平。
(4)优点:克服远缘杂交不亲和的障碍,定向改造生物的遗传性状。
2.基因工程的基本工具
(1)限制性内切核酸酶
(2)DNA连接酶
①作用:将限制酶切割下来的DNA片段拼接成新的DNA分子,恢复被限制酶切开的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。
②类型
常用类型
E.coli DNA连接酶
T4 DNA连接酶
来源
大肠杆菌
T4噬菌体
特点
只缝合黏性末端
缝合黏性末端和平末端
(3)载体
3.实验:DNA的粗提取与鉴定
(1)实验原理
①提取的原理:
a.DNA不溶于酒精,但某些蛋白质可以,利用这一原理,可初步分离DNA与蛋白质。
b.DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,能溶于2 mol/L的NaCl溶液。
②鉴定的原理:DNA+二苯胺试剂蓝色
(2)方法步骤
[重点整合]
1.基因工程的理论基础
2.图解限制酶的选择原则
(1)不破坏目的基因原则:如图甲中可选择PstⅠ,而不选择SmaⅠ。
(2)保留标记基因原则:质粒作为载体必须具备标记基因,所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构,如图乙中不选择SmaⅠ。
(3)确保出现相同黏性末端原则:通常选择与切割目的基因相同的限制酶,如图甲中PstⅠ;为避免目的基因和质粒自身环化和随意连接,也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒,如图甲也可选择PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶。
3.标记基因的作用
标记基因可用于检测目的基因是否导入受体细胞:
4.与DNA有关的几种酶的比较
[考向突破]
考向一 基因工程所需工具酶分析
1.用限制酶EcoR Ⅴ单独切割某普通质粒,可产生14 kb(1 kb即1000个碱基对)的长链,而同时用限制酶EcoR Ⅴ、Mbo Ⅰ联合切割该质粒,可得到三种长度的DNA片段,见下图(其中*表示EcoR Ⅴ限制酶切割后的一个黏性末端)。
若用Mbo Ⅰ限制酶单独切割该普通质粒,则产生的DNA片段的长度为( )
A.2.5和5.5 B.2.5和6
C.5.5和8 D.6和8
解析 依图示可知,该质粒上有1个EcoR Ⅴ限制酶的切点、2个Mbo Ⅰ限制酶的切点,故用限制酶Mbo Ⅰ单独切割该质粒时,将产生长度为6和8的两种DNA片段,故D正确。
答案 D
2.(2022·南京模拟)若要利用某目的基因(见图甲)和质粒载体(见图乙)构建重组DNA(见图丙),限制性内切核酸酶的酶切位点分别是Bgl Ⅱ(A↓GATCT)、EcoR Ⅰ(G↓AATTC)和Sau3A Ⅰ(↓GATC)。下列叙述正确的是( )
A.用EcoR Ⅰ切割目的基因和质粒载体
B.用Bgl Ⅱ和EcoR Ⅰ切割目的基因和质粒载体
C.用Bgl Ⅱ和Sau3A Ⅰ切割目的基因和质粒载体
D.用EcoR Ⅰ和Sau3A Ⅰ切割目的基因和质粒载体
解析 用EcoR Ⅰ切割目的基因和质粒载体,产生相同的黏性末端,用DNA连接酶连接时可能会发生反向连接,A错误;用Bgl Ⅱ和EcoR Ⅰ切割目的基因会产生两种DNA片段,一种含有目的基因,一种不含目的基因,且有目的基因的片段与载体结合时容易发生反向连接,B错误;用Bgl Ⅱ和Sau3A Ⅰ切割目的基因和载体,分别产生不同的黏性末端和平末端,但目的基因插入载体后,R